Naslov
Usporedba i odabir prikladne metode za djelotvornu analizu autofagije u staničnim uzorcima
(Comparison and adequate method selection for effective autophagy detection in cell culture samples)

Autori
Žuvela, Lucija

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Mjesto
Osijek

Datum
23.09

Godina
2019

Stranica
31

Mentor
Opačak-Bernardi, Teuta

Ključne riječi
autofagija ; autolizosomi ; bojanje ; MDC ; AO ; stanična kultura ; protočna citometrija
(autophagy ; autolysosomes ; staining ; MDC ; AO ; cell culture ; flow cytometry)

Sažetak
Usporediti tri osnovna principa bojanja autofagnih vakuola. Nakon pripreme uzoraka i bojanja, analizom rezultata odrediti koja od metoda je najprikladnija za detekciju autofagije u našim uvjetima rada. Materijal i metode: Uzorci HeLa stanične linije (1 – 3 x 105 stamica po jažici), inkubirane u 24h, 48h, i 72h u tri različita medija obojani su po protokolima za bojanje. Rezultati su analizirani na protočnom citometru. Rezultati: Bojanje MDC-om i komercijalnim kitom za detekciju autofagije ne daje vidljivu razliku u rezultatima zbog neoptimalnih postavki lasera ili smanjene fluorescencije. Najbolje rezultate, s najvidljivijom razlikom, daje bojanje AO-m. Zaključak: Bojanje autofagnih vakuola je relativno su brza i jednostavna metoda praćenja autofagije. Najbolje rezultate daje bojanje AO-m. Metode bojanja nisu dostatne samostalno i potrebno je paralelno provoditi još nekoliko metoda za detekciju autofagije kako bi se mogli donijeti čvrsti i točni zaključci o autofagiji u odabranim uzorcima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija, Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA