Naslov
Određivanje količine proteina Cas3 u ovisnosti o jačini promotora, temperaturi i šaperonu HtpG u bakteriji Echerichia coli
(Determination of the amount of Cas3 protein depending on the strength of the promoter, temperature and chaperone HtpG in Escherichia coli)

Autori
Barbarić, Lea

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet/ Biološki odsjek

Mjesto
Zagreb

Datum
15.07

Godina
2021

Stranica
63

Mentor
Ivančić Baće, Ivana

Neposredni voditelj
Mitić, Damjan

Ključne riječi
CRISPR-Cas, Cas3, temperatura, fag lambda, HtpG, E. coli
(CRISPR-Cas, Cas3, temperature, phage lambda, HtpG, E. coli)

Sažetak
Zbog učestalih napada bakteriofagima, veliki udio bakterija razvilo je specifičan obrambeni sustav adaptivne imunosti koji se naziva CRISPR-Cas. Sustav se sastoji od seta gena cas i lokusa CRISPR koji se sastoji od kratkih ponavljajućih sljedova između kojih se ugrađuju razmaknice koje potječu od strane DNA. U bakteriji Escherichia coli efikasnost zaštite bakterija od faga sustavom CRISPR-Cas ovisi o aktivnosti proteina Cas3 koja pak ovisi o temperaturi inkubacije i šaperonu HtpG. U ovom radu je istraženo utječe li šaperon HtpG na količinu proteina Cas3 u ovisnosti o temperaturi i jačini promotora. Uz to, istraženo je da li promjene u konformaciji šaperona HtpG utječu na aktivnost proteina Cas3, odnosno na efikasnost zaštite od infekcije. rezultati sugeriraju da šaperon HtpG utječe na funkcionalne količine proteina Cas3 u ovisnosti o temperaturi, dok točkaste mutacije u proteinu HtpG nemaju utjecaja na interakciju HtpG s proteinom Cas3. Jačina promotora za gen cas3 je ključna i analiza količina poteina Cas3 je moguća samo nakon ekspresije s inducibilnog promotora.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija, Biologija

POVEZANOST RADA