Naslov
Razvoj i validacija analitičke metoda za identifikaciju i određivanje sadržaja natrijeva hijaluronata u oftalmološkim pripravcima

Autori
Skitarelić, Matea

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Odjel za biotehnologiju

Mjesto
Rijeka

Datum
11.09

Godina
2015

Stranica
64

Mentor
Malenica Staver, Mladenka ; Štanfel, Danijela

Ključne riječi
Natrijev hijaluronat ; oftalmološki pripravci ; tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti ; validacija analitičke metode
(Sodium hyaluronate ; oftalmologic preparations ; high performance liquid chromatography ; validation of analytical method)

Sažetak
Za identifikaciju i određivanje sadržaja Na – hijaluronata (polimer glukuronske kiseline i N– acetilglukozamina) u oftalmološkim pripravcima Vizol S (udio Na –hijaluronata: 0, 21% i 0, 4%) te Vizol S Intensive (udio Na – hijaluronata: 0, 15%), optimirana je te validirana metoda tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti (HPLC) s UV detektorom. S obzirom na nedostatak UV apsorbirajućeg kromofora te njegovu veliku molekulsku masu, analiza se temeljila na kromatografiji isključenjem odnosno gel filtraciji u kojoj se odjeljivanje provodi prema veličini molekula. Prije same analize na tekućinskom kromatografu visoke djelotvornosti uz detekciju UV detektorom na valnoj duljini 205 nm, optimirana je i priprema uzoraka. Izabrana kolona za kromatografiju isključenjem (gel filtraciju) Agilent BIO SEC 3 (300 mm x 7, 8 mm), uz ispiranje fosfatnim puferom (pH = 7, 0) te detekcijom pomoću UV detektora pokazala je dobro odvajanje Na – hijaluronata od drugih komponenti uzorka. Vrijeme zadržavanja pika (engl. peak) Na – hijaluronata iznosi oko 5, 1 min s faktorom simetrije 1, 94. Preciznost sustava, unutar dana, za identifikaciju i određivanje Na – hijaluronata iskazana je relativnom standardnom devijacijom (RSD %) (n = 6) koja iznosi 0, 21% i ukazuje na dobru podudarnost rezultata dobivenih metodom tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti. Ponovljivost metode izražena je relativnom standardnom devijacijom koja iznosi: 0, 2% za uzorak Vizol S sa 0, 21%, 0, 3% za uzorak Vizol S s 0, 4% i 0, 7% za uzorak Vizol S Intensive s 0, 15% Na – hijaluronata. Točnost metode ispitana je za sve tri koncentracije uzoraka kapi za oči Vizol S na pet koncentracija, od 50% do 150%. Srednja vrijednost povrata za uzorke s 0, 21% i 0, 4% Na – hijaluronata iznosila je 101, 28 % te 101, 77% za uzorak s 0, 15% Na – hijaluronata. Linearnost metode određena je u jednakom rasponu kao i točnost te dokazana grafički i matematički. Koeficijent korelacije za sve uzorke iznosi 0, 999.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija, Farmacija

POVEZANOST RADA