Naslov
Izolacija i pročišćavanje halogenhidrin-dehalogenaze iz stanica genetski modificirane Escherichia coli
(Isolation and purification of halohydrin dehalogenase from the genetically modified Escherichia coli)

Autori
Mihaljević, Iva

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije

Mjesto
Zagreb

Datum
22.09

Godina
2020

Stranica
35

Mentor
Findrik Blažević, Zvjezdana

Neposredni voditelj
Milčić, Nevena

Ključne riječi
halogenhidrin-dehalogenaza, enzim, epoksid, izolacija enzima, statin
(halohydrin dehalogenase, enzyme, epoxide, enzyme isolation, statin)

Sažetak
U ovom radu provedena je izolacija i pročišćavanje enzima halogenhidrin-dehalogenaze (HheC). Najprije je uzgojena biomasa genetski modificiranih stanica Escherichia coli s visokim udjelom HheC. Nakon razbijanja bakterijskih stanica ultrazvukom, odvojeni su proteini od ostatka staničnog materijala centrifugiranjem te je dobiven sirovi enzimski ekstrakt. Kako bi se utvrdila uspješnost eksperimenta, mjerena je koncentracija proteina metodom po Bradfordu i aktivnost enzima HheC spektrofotometrijskim testom. Proces izolacije HheC je bitan za biokatalizu jer je otkriveno da ovaj enzim ima sposobnost kataliziranja reakcije otvaranja epoksida s malim “neprirodnim” anionskim nukleofilima, kao što su azid, cijanid, cijanat, tiocijanat, nitrit i formijat. Također, bitna primjena HHDH enzima je u proizvodnji optički čistih C3 ili C4 prekursora, na primjer, (R)-4-cijano-3-hidroksibutanoata za sintezu statina.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemijsko inženjerstvo, Biotehnologija

POVEZANOST RADA