Naslov
ANTIFUNGALNI I ANTIGENOTOKSIČNIUČINCI OLEUROPEINA
(ANTIFUNGAL AND ANTIGENOTOXICEFFECTS OF OLEUROPEIN)

Autori
Zorić, Nataša

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
21.07

Godina
2017

Stranica
239

Mentor
Kosalec, Ivan ; Tomić, Siniša

Ključne riječi
oleuropein, hidroksitirosol, ekstrakt maslinova lista, Candida albicans, antifungalni učinak, apoptoza, virulentni čimbenik, inhibicija germinacije, biofilm, stanična površinska hidrofobnost, modulacija ergosterola, hidrolitički enzimi, aspartil-proteaze, citotoksičnost, antioksidativna aktivnost, antigenotoksični učinak, kometni test, humani limfociti
(oleuropein, hydroxytyrosol, extract of olive leaf, Candida albicans, antifungal activity, apoptosis, virulence factor, inhibition of germ-tube formation, biofilm, cellular surface hydrophobicity, modulation of ergosterol content, hydrolytic enzymes, aspartyl-proteases, cytotoxicity, antioxidative activity, antigenotoxic effect, comet assay, human lymphocytes)

Sažetak
Učinak sekundarnog metabolita masline (Olea europaeaL.) oleuropeina, njegovog razgradnog produkta hidroksitirosola i vodenog ekstrakta maslinova lista na staničnu vijabilnost medicinski značajne gljivične vrste Candida albicansispitan je in vitrotestovima. Metodom mikrodilucije određene su minimalne inhibitorne koncentracije (MIK) koje uzrokuju 80 % smanjenja stanične vijabilnosti i koje su iznosile 12, 5 mg/ml za oleuropein, 6, 25 mg/ml za hidroksitirosol i 25 mg/ml za vodeni ekstrakt maslinova lista. Kvantitativna analiza s fluorescentnim bojanjem upućuje nazaključak da je apoptoza primarni način stanične smrti u uzorcima tretiranim sa sub-MIK koncentracijama ovih tvari. Budući da je patogenost vrste određena virulentnim čimbenicima, ispitani su učinci oleuropeina i hidroksitirosola na najznačajnije virulentne čimbenike vrste C. albicans. Utvrđen je inhibitorni učinak ovih fenolnih tvari na promjenuu hifalni oblik rasta kodvrsteC. albicansinduciranu u uvjetima staničnog gladovanja. Pri sub-MIK koncentracijama, oleuropein i hidroksitirosolnisupokazali inhibitorno djelovanje nastvaranjebiofilmaove vrste.Pri subinhibitornim koncentracijama nakon 24 sata inkubacije, oleuropein i hidroksitirosol su uzrokovalimodulaciju stanične površinske hidrofobnosti koja se dovodi u svezu s adherencijomvrsteC. albicansna biomaterijale.UzgojvrsteC. albicansu prisutnosti oleuropeina i hidroksitirosola je uzrokovao inhibiciju aktivnosti kandidinih hidrolitičkih enzima, aspartil-proteaza (Sap) i α-glukozidaza.TretiranjemvrsteC. albicanss oleuropeinom i hidroksitirosolom utvrđeno je višestruko djelovanje ovih tvari uključujući oštećenje stanične stijenke, stanične membrane i otpuštanje citoplazmatskog sadržaja (DNAi proteina). S obzirom da nekiantimikotici djeluju kao inhibitori biosinteze ergosterola, provedeno je ispitivanje učinka oleuropeina i hidroksitirosola na modulaciju ergosterola kojima je utvrđeno smanjenje ovog sterola u ovisnostio primijenjenoj koncentraciji. Uz testove određivanja djelovanja na gljivičnu vrstu, ispitani su mogući citotoksični igenotoksični učinci na stanice nositelja. Navedene tvari nisu pokazale hemolitičku aktivnost na humanim eritrocitima pri testiranim koncentracijama u rasponu 3-60 μM. Ispitivanje učinka na humanim limfocitima periferne krvi provedeno kometnim testom pokazalo je protektivno djelovanje ovih tvari na oštećenja DNAinducirana s mutagenom H2O2, pri čemu je hidroksitirosol imao boljiprotektivniučinak u usporedbi s oleuropeinom nakon 120 min predtretmana s ispitivanim tvarima u koncentracijama 1, 5 i 10 μM.Navedeni genoprotektivni učinci su posljedica snažnog antioksidativnog djelovanja ovih fenolnih spojeva utvrđenih ABTS, FRAP i CUPRAC metodom.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA