Naslov
Djelovanje eHsp70, LPS-a i LPS na aktivaciju NLRP3 inflamasoma i piroptoze u NCI-H292 stanicama
(Effect of eHsp70, LPS and LPS on activation of NLRP3 inflammasome and pyroptosis in NCI-H292 cells)

Autori
Fabijanec, Marija ; Grdić Rajković, Marija ; Hlapčić, Iva ; Rumora, Lada

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
FARMEBS Simpozij studenata farmacije i medicinske biokemije 2019 / Bojić, Mirza ; Somborac Bačura, Anita - Zagreb : Farmaceutsko-biokemijski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 2019, 29-29

ISBN
978-953-8273-01-8

Skup
8. simpozij studenata farmacije i medicinske biokemije (FARMEBS 2019)

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 01.06.2019

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
NCI-H292 stanice, eHsp70, NLRP3 inflamasom, piroptoza
(NCI-H292 cells, eHsp70, NLRP3 inflammasome, pyroptosis)

Sažetak
Kronična opstrukcijska plućna bolest (KOPB) je bolest sa složenom patogenezom koja uključuje kroničnu upalu. Upalu mogu uzrokovati molekularni obrasci oštećenja (DAMP, engl. damage-associated molecular pattern), npr. izvanstanični protein toplinskog šoka 70 (eHsp70), i molekularni obrasci povezani s patogenima (PAMP, engl. pathogen-associated molecular pattern), npr. lipopolisaharid (LPS) i lipoteikoična kiselina (LTA). Cilj rada bio je ispitati djelovanje rekombinantnog humanog (rh) Hsp70 (0, 3, 1 i 3 μg/mL), LPS-a (0, 1 µg/mL) i LTA (1 µg/mL) te njihovih kombinacija na NCI-H292 bronhijalne epitelne stanice tijekom 24-satne inkubacije radi utvrđivanja dolazi li do aktivacije inflamasoma NLR receptora koji sadrži N-terminalnu pirinsku domenu tipa 3 (NLRP3) i piroptoze. Aktivacija NLRP3 inflamasoma i upalni odgovor ispitani su određivanjem ekspresije mRNA za NLRP3, kaspazu-1 i upalni citokin interleukin-1β (IL-1β) kvantitativnim PCR-om (qPCR). Vijabilnost stanica ispitana je određivanjem aktivnosti laktat-dehidrogenaze (LDH) izlučene u medij iznad stanica, a njihov način umiranja ispitan je određivanjem ekspresije proteina gasdermina D Western blot analizom i spomenutim qPCR analizama za kaspazu-1 i IL-1β (piroptoza). Dokazano je da pojedinačna tretiranja s rhHsp70, LPS-om i LTA uzrokuju pojačanu ekspresiju mRNA za NLRP3, kaspazu-1 i IL-1β u NCI-H292 stanicama, što ukazuje na aktivaciju NLRP3 inflamasoma i upalu. Suprotno tome, aktivacija NLRP3 inflamasoma potisnuta je kombiniranim tretiranjima. Određene kombinacije rhHsp70, LPS-a i LTA pokazuju zaštitno djelovanje na NCI-H292 stanice (povećavaju vijabilnost). 1µg/mL rhHsp70, LPS i LTA smanjuju vijabilnost stanica (porast katalitičke aktivnosti LDH), a povećana ekspresija mRNA za IL-1β i kaspazu-1 te povećana ekspresija proteina gasdermina D ukazuju na piroptozu. Individualno djelovanje eHsp70 na NCI-H292 stanice je upalno pri čemu dolazi do aktivacije NLRP3 inflamasoma i staničnog umiranja, a u kombinaciji s bakterijskim produktima djeluje suprotno. Ovi rezultati ukazuju da bi tijekom akutnih egzacerbacija u bolesnika s KOPB-om izazvanim bakterijskim infekcijama eHsp70 mogao imati povoljan učinak.

Izvorni jezik
Engleski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Farmacija

POVEZANOST RADA