Naslov
DJELOVANJE KOFEINA PRI NASTANKU OKSIDATIVNOG OŠTEĆENJA I KRISTALIZACIJE U STANIČNOM MODELU OKSALATNE UROLITIJAZE PROKSIMALNIH BUBREŽNIH TUBULA (LLC-PK TIP I)
(EFFECTS OF CAFFEINE ON DEVELOPMENT OF OXIDATIVE STRESS AND CRYSTALLIZATION ON IN VITRO MODEL OF OXALATE UROLITHIASIS)

Autori
Cindric, Anita

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Medicinski fakultet Osijek

Mjesto
Osijek

Datum
17.07

Godina
2019

Stranica
39

Mentor
Smolic, Martina

Ključne riječi
glutation ; kalcijev oksalat ; kofein ; LLC-PK tip I ; urolitijaza
(glutathione ; caffeine ; calcium oxalate ; LLC-PK1 ; urolithiasis)

Sažetak
SAŽETAK Cilj istraživanja: Utvrditi toksični učinak kalcijevog oksalata na epitelnim stanicama proksimalnih bubrežnih tubula staničnog tipa LLC-PK tip I i procijeniti učinkovitost različitih koncentracija kofeina u zaustavljanju kristalizacije kalcijevog oksalata u staničnom modelu oksalatne urolitijaze. Odrediti razinu opterećenja stanica slobodnim radikalima mjerenjem koncentracija glutationa (GSH) nakon tretmana kalcijevim oksalatom i kofeinom. Nacrt studije: Stručna istraživačka studija Materijali i metode: Korištena stanična kultura je Lilly Laboratories Cell Porcine Kidney, stanična linija proizvedena iz bubrega normalne, zdrave muške svinje (Sus scrofa) između 3. i 4. tjedna starosti. Od kemikalija korišten je kofein (Sigma) te kalcijev oksalat (Sigma-Aldrich). Stanice su uzgajane u pločama sa šest jažica te su tretirane kalcijevim oksalatom i kofeinom u odgovarajućim koncentracijama. Nakon inkubacije svjetlosnom mikroskopijom pratio se nastanak kristalizacije i utjecaj djelovanja kofeina nakon jednog, tri i 24 sata te su se učinile mikrofotografije EVOSTM FL Color mikroskopom. Koncentracija ukupnog glutationa izmjerena je spektrofotometrijski pomoću komercijalno dostupnog kita (Glutathione Assay Kit, Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, SAD). Vijabilnost stanica u suspenziji utvrdila se ekskluzijskim testom Trypan Blue bojom (Sigma-Aldrich, St. Louis, SAD) uz pomoću Neubauerovog hemocitometra svjetlosnom mikroskopijom. Rezultati: Proporcionalnim povećanjem koncentracije, kofein zaustavlja kristalizaciju kalcijevog oksalata u staničnom modelu oksalatne urolitijaze proksimalnih bubrežnih tubula – LLC-PK tip I. Kofein kao potencijalna zaštitna terapija uzrokuje značajno preživljenje stanica. Ekspresija ukupnog glutationa pokazala je da oksidativno oštećenje stanica koje su tretirane samo kalcijevim oksalatom veće u odnosu na stanice koje su tretirane, osim kalcijevim oksalatom, i kofeinom. Zaključak: Kofein sprječava nastanak kristalizacije kalcijevog oksalatnog monohidrata u staničnom modelu oksalatne urolitijaze proksimalnih bubrežnih tubula – LLC-PK tip I. Ključne riječi: glutation ; kalcijev oksalat ; kofein ; LLC-PK tip I ; urolitijaza

Izvorni jezik
Hrvatski

POVEZANOST RADA