Naslov
Pojačana ekspresija, pročišćavanje i kristalizacija proteina CrdA te optimizacija kristalizacije proteina HP1026 iz bakterije Helicobacter pylori
(Overexpression, purification and crystallization of CrdA protein and optimization of crystallization of HP1026 protein from Helicobacter pylori)

Autori
Matković, Vigor

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
10.07

Godina
2018

Stranica
107

Mentor
Matković-Čalogović, Dubravka

Neposredni voditelj
Kekez, Ivana

Ključne riječi
CrdA, HP1026, kloniranje, kristalizacija, pročišćavanje, SUMO
(CrdA, cloning, crystallization, HP1026, purification, SUMO)

Sažetak
Bakterija Helicobacter pylori je Gram-negativna spiralna bakterija koja u čovjeku kolonizira stijenku želuca te dugoročnom infekcijom s bakterijom (pogotovo soj P12) dolazi do razvoja mnogih oboljenja gornjeg gastrointestinalnog trakta. Izvršena je pojačana ekspresija proteina HP1026 (helikaze odgovorne za rekombinantne aktivnosti) iz soja P12 H. pylori, pročišćavanje te kristalizacija metodom difuzije para tehnikom sjedeće kapi (engl. "sitting drop"). Na XRD1 stanici sinkrotrona „Elettra Sincrotrone Trieste“ istražena je kvaliteta 20 kristala s obzirom na difrakciju rentgenskih zraka na monokristalu. Najbolji difrakcijski podaci sakupljeni su do razlučenja od 4 Å u heksagonskom kristalnom sustavu i s parametrima jedinične ćelije od a= 116, 22(2) Å, c= 238, 38(2) Å. Također je predložena vrlo jednostavna i uspješna metoda kloniranja gena crdA, indukcije pojačane ekspresije, pročišćavanja te kristalizacije proteina CrdA iz H. pylori soja P12 prethodnom pripravom fuzijskog SUMO proteina. U konačnici je dobiven čist i koncentriran protein CrdA u otopini, koji se može koristiti dalje u kristalizacijskim eksperimentima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija

POVEZANOST RADA