Naslov
Izražaj čimbenika neovaskularizacije u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije u CD26 deficijentim miševima
(Expression of Neovascularization Factors in CD26 Deficient Mice with Experimental Hyperglycemia)

Autori
Kovač, Anja

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Odjel za biotehnologiju

Mjesto
Rijeka

Datum
27.07

Godina
2018

Stranica
75

Mentor
Batičić Pučar, Lara

Neposredni voditelj
Pernjak Pugel, Ester

Ključne riječi
cijeljenje rana, dijabetes, dipeptidil-peptidaza IV (DPP IV/CD26), HIF-1α, hiperglikemija, neovaskularizacija, VEGF
(diabetes, dipeptidyl-peptidase IV (DPP IV/CD26), HIF-1α, hyperglycemia, neovascularization, VEGF, wound healing)

Sažetak
Uvod: Dipeptidil-peptidaza IV, odnosno molekula CD26 (DPP IV/CD26) ubikvitaran je transmembranski protein i serinska proteaza koja cijepa brojne biološki aktivne supstrate među kojima i one važne u regulaciji koncentracije glukoze u krvi. Prethodna istraživanja ukazala su na važnu ulogu DPP IV/CD26 u procesu angiogeneze, migracije stanica i apoptoze. Međutim, patofiziološki procesi cijeljenja rana u dijabetesu, koji predstavljaju značajan javnozdravstveni problem, nedovoljno su razjašnjeni. Pretpostavka ovog istraživanja je da DPP IV/CD26 ima važnu ulogu u procesu cijeljenja rana u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije putem utjecaja na izražaj ključnih čimbenika neovaskularizacije. Cilj istraživanja bio je uspostaviti pokusni model dijabetesa te model cijeljenja rana u CD26 deficijentnom (CD26-/-) i u divljem tipu miša (C57BL/6), te ispitati utječe li nedostatak DPP IV/CD26 na izražaj važnih čimbenika neovaskularizacije (VEGF i HIF-1α), praćenjem makroskopskih i mikroskopskih promjena tijekom procesa regeneracije i reparacije tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Materijali i metode: Pokusnim životinjama CD26-/- i C57BL/6 soja induciran je eksperimentalni dijabetes intraperitonealnom aplikacijom otopine streptozotocina u citratnom puferu u dozi od 50 mg/kg tijekom 5 dana. Razvoj dijabetesa potvrđen je temeljem kliničkih, biokemijskih i histoloških parametara. Potom su pokusnim životinjama inducirane rane na dorzalnom dijelu tijela te su životinje žrtvovane drugog, četvrtog, sedmog, desetog i petnaestog dana cijeljenja rana. Provedena su histomorfometrijska, patohistološka i imunohistokemijska istraživanja na uzorcima tkiva rana, kontrolnih koža i gušterači. Određivan je izražaj čimbenika neovaskularizacije VEGF i HIF-1α, stupanj regeneracije koriuma te stupanj neovaskularizacije koriuma. Spektrofotometrijski je praćena enzimska aktivnost DPP IV/CD26 u tkivu kože rana divljeg tipa životinja tijekom procesa cijeljenja rana tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Rezultati: Analiza rezultata potvrdila je bolju toleranciju glukoze u CD26-/- soju miševa u odnosu na divlji tip. Histomorfometrijska analiza tkiva rana pokazuje veći stupanj regeneracije koriuma i smanjeno trajanje upalne faze u CD26-/- soju miševa dok C57BL/6 miševi pokazuju sporije stvaranje novog epidermisa i prekrivanje rane. Nadalje, nedostatak DPP IV/CD26 pozitivno utječe na bujanje veziva i retrakciju tkiva. Izražaj čimbenika neovaskularizacije HIF-1α i VEGF statistički je značajno viši (p<0, 05) kod CD26-/- životinja u odnosu na C57BL/6 soj, u svim ispitivanim danima cijeljenja tkiva. Broj novostvorenih kapilara u koriumu statistički je značajno viši (p<0, 05) sedmog i desetog dana u CD26-/- soju u odnosu na C57BL/6 soj. Enzimska aktivnost DPP IV/CD26 statistički je značajno snižena (p<0, 05) u tkivu rana u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije kod C57BL/6 miševa drugog, četvrtog i sedmog dana cijeljenja u odnosu na odgovarajuću kontrolu. Zaključak: Potvrđena je pretpostavka o značajnoj ulozi DPP IV/CD26 u homeostazi glukoze te u procesu regeneracije i reparacije tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Nedostatak molekule CD26 povezan je s boljom tolerancijom glukoze, manje izraženim upalnim odgovorom, povećanjem izražaja čimbenika neovaskularizacije HIF-1α i VEGF te poboljšanom neovaskularizacijom koriuma u procesu cijeljenja rana kože. Dobiveni rezultati ukazuju na značajnost inhibicije DPP IV/CD26 kao moguće terapije u liječenju poremećaja cijeljenja rana u oboljelih od dijabetesa.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Biotehnologija u biomedicini (prirodno područje, biomedicina i zdravstvo, biotehničko područje)

POVEZANOST RADA