Naslov
Pogreške u testiranju RAS mutacija u procesu liječenja metastatskog kolorektalnog karcinoma (mCRC)
(Problems in detection of RAS mutations in the process of treating metastatic colorectal cancer (mCRC))

Autori
Tečić Vuger, Ana ; Ramić, Snježana ; Šitić, Sanda ; August, Davor ; Silovski, Tajana ; Šeparović, Robert

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, stručni

Izvornik
Knjiga sažetaka 3. kongresa Hrvatskog društva za internističku onkologiju HLZ-a i 9. radnog sastanka radne skupine za onkološko ljekarništvo HFD-a / Damir, Vrbanec, Borislav, Belev ; Ivan, Bilić - Zagreb, 2015, 77-77

Skup
3. KONGRES HRVATSKOG DRUŠTVA ZA INTERNISTIČKU ONKOLOGIJU HLZ-a 9. RADNI SASTANAK RADNE SKUPINE ZA ONKOLOŠKO LJEKARNIŠTVO HFD –a

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 20.11.2015. - 21.11.2015

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
kolorektalni karcinom, RAS mutacije
(colorectal cancer, RAS mutations)

Sažetak
RAS obitelj gena uključuje tri člana: KRAS, HRAS i NRAS. Prema FIRE 3, PRIME i CRYSTAL studiji KRAS mutacije zastupljene su u preko 40% slučajeva mCRC, a NRAS i BRAF u 10%, dok je u 50% slučajeva gen divlji tip (wild type, wt). U slučaju prisutne RAS mutacije anti-EGFR terapija nije indicirana. Danas dostupne metode analize RAS mutacija (PCR, pirosekvencioniranje, sekvencioniranje) imaju prag detektabilnosti 1% do 5% te osjetljivost i specifičnost 95%, uz uporabu DNA proba za detekciju KRAS i NRAS mutacija. Kvalitetnu analizu uvjetuju dobra selekcija tkiva od strane iskusnog patologa (u uzorku potrebno više od 10% tumorske DNA), korištenje referentne, certificirane metode analize, izolacija tumorske DNA, genotipizacija te interpretacija nalaza. Optimalan uzorak za analizu je svježe tumorsko tkivo, ali i uzorci tumora uklopljeni u parafin, što je danas najčešći način izolacije tumorske DNA. U Klinici za tumore od 2013. do 10/2015 na RAS mutacije testirana su 23 bolesnika. Većina analiza provedena je na Cobas® Z 480 Roche PCR uređaju. Testirano je 11 muškaraca i 12 žena, prosječne starosti 53, 3 godine. U 15 bolesnika (65, 2%) prisutna je jedna od mutacija. U slučaju KRAS wt, provedeno je testiranje na NRAS. Raspodjela RAS mutacija je slijedeća: KRAS mutacija na egzonu 2 (kodoni 12/13) zabilježena je u 12 bolesnika, KRAS mutacija na egzonu 3 (kodon 61) u 1 bolesnika, KRAS mutacija na egzonu 4 (kodon 146) u 1 bolesnika, NRAS mutacija na egzonu 2 (kodoni12/13) u 1 bolesnika, a RAS wt zabilježen je u 8 bolesnika. Mogući razlozi odstupanja rezultata od onih zabilježenih u studijama jesu premali i neadekvatni uzorci (potrebno minimalno 50 ng izolirane DNA), fragmentiranost DNA te loše skladištenje parafinskih kocaka, što može dati lažno negativan rezultat. Nestručno rukovanje može kontaminirati uzorak stranom DNA (lažno pozitivan uzorak), spojevima koji ometaju PCR reakciju (lažno negativan uzorak), a problem može biti i u samom testu (prema proizvođaču Cobas® u < 0, 2% slučajeva moguć lažno negativan nalaz, ako su prisutne rijetke mutacije koje nisu analizirane, ili lažno pozitivan nalaz, ako su prisutne iznimno rijetke i složene mutacije - cross-reactivity.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA