Naslov
Metode ispitivanja metabolički stabilnih spojeva
(Test methods for metabolically stable compounds)

Autori
Jurmanović, Sanja

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb, Hrvatska

Datum
27.11

Godina
2015

Stranica
86

Mentor
Mildner, Boris

Neposredni voditelj
Milić, Astrid

Ključne riječi
hepatociti/klirens ; LC-MS/MS ; metabolička stabilnost ; “relay“ metoda
(clearance ; hepatocytes ; LC-MS/MS ; metabolic stability ; relay method)

Sažetak
Određivanje in vitro metaboličke stabilnosti predstavlja jedan od važnih koraka u ranoj fazi istraživanja novih lijekova, pri čemu poseban izazov predstavljaju vrlo stabilni spojevi. U ovom radu je razvijena tzv. metoda produžene inkubacije spojeva (engl. relay assay) u štakorskim hepatocitima, a u cilju preciznijeg određivanja intrinzičkog klirensa upravo metabolički stabilnih spojeva, tj. spojeva vrlo niskog klirensa. U tu je svrhu korišteno 9 komercijalnih spojeva (ranitidin, kofein, cimetidin, acebutolol, feksofenadin, antipirin, teofilin, tolbutamid, varfarin) koji su pokazali niski klirens, kako u standardnom pokusu određivanja metaboličke stabilnosti u štakorskim hepatocitima unutar 3 sata, tako i prema klasifikaciji metaboličke stabilnosti na temelju postotka početnog spoja u 90-toj minuti inkubacije. Metodom produžene inkubacije spojeva s hepatocitima prevladana je prepreka gubitka aktivnosti enzima u hepatocitima na način da se na kraju optimalnog vremena inkubacije (4 h) supernatant inkubacije prebacuje na svježe otopljene hepatocite. U konačnici, in vitro hepatički klirens spojeva određen je koristeći ciklus od 4 pokusa, s ukupnim vremenom inkubacije od 16 h. Dobiveni rezultati potvrđuju da se metoda produžene inkubacije uspješno može koristiti, kako u ranim fazama, tako i u kasnijim fazama otkrivanja novih lijekova, za predviđanje ponašanja metabolički stabilnih spojeva u štakorskom i humanom in vivo sustavu. Metoda je visokoprotočna, relativno niske cijene, te se lako može uklopiti u laboratorije koji se bave ispitivanjem metabolizma lijekova i farmakokinetikom (engl. drug metabolism and pharmacokinetics, DMPK) bez dodatnog ulaganja u instrumentaciju.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija

POVEZANOST RADA