Naslov
Potvrđivanje vezanja Zn, Cu i Cd na metalotioneine u citosolu jetre vardarskog klena (Squalius vardarensis Karaman) korištenjem visoko djelotvorne tekućinske kromatografije i masene spektrometrije
(Confirmation of Zn, Cu and Cd binding to metallothioneins in the hepatic cytosol of Vardar chub (Squalius vardarensis Karaman) by use of high performance liquid chromatography and mass spectrometry)

Autori
Krasnići, Nesrete ; Montes-Bayón, Maria ; Dragun, Zrinka ; Alonso García, Francisco Javier ; Corte Rodriguez, Mario ; Erk, Marijana ; Ramani, Sheriban ; Jordanova, Maja ; Rebok, Katerina ; Kostov, Vasil

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
2. Simpozij o biologiji slatkih voda : Knjiga sažetaka = 2nd Symposium on Freshwater Biology : Book of Abstracts / Gračan, Romana ; Matoničkin Kepčija, Renata ; Miliša, Marko ; Ostojić, Ana - Zagreb : Hrvatsko udruženje slatkovodnih ekologa, 2017, 45-46

Skup
Simpozij o biologiji slatkih voda = 2nd Symposium on Freshwater Biology

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 17.02.2017

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
metalotionein ; jetra ; vardarski klen ; visoko djelotvorna tekućinska kromatografija ; masena spektrometrija
(metallothionein ; liver ; vardar chub ; high performance liquid chromatography ; mass spectrometry)

Sažetak
Metalotioneini (MT) su citosolski proteini odgovorni za homeostazu esencijalnih metala, poput Zn i Cu, i detoksikaciju neesencijalnih metala, poput Cd. Cilj ovoga istraživanja bio je potvrditi vezanje ova tri metala na MT u citosolu jetre vardarskog klena (Squalius vardarensis Karaman) uzorkovanog u listopadu 2012. godine u Krivoj reci, onečišćenoj rudarskim otpadom, u sjeveroistočnoj Makedoniji. Primijenjeni analitički pristup sastojao se od sljedećih koraka: (1) usporednog frakcioniranja citosolskih proteina iz jetre klena i standarda MT na osnovu njihove molekulske mase primjenom visokodjelotvorne tekućinske kromatografije s isključenjem po veličini (SE-HPLC), koje je bilo praćeno određivanjem koncentracija odabranih metala u tako dobivenim proteinskim frakcijama pomoću spektrometra masa s induktivno spregnutom plazmom (ICP-MS) ; (2) frakcioniranja proteina prema molekulskoj masi pomoću ultrafiltera, sa svrhom odvajanja proteina molekulske mase >30 kDa, koje je bilo praćeno daljnjim frakcioniranjem tih proteina pomoću anionsko- izmjenjivačke kromatografije (AEX-HPLC) te određivanjem raspodjele profila metala u tako dobivenim frakcijama primjenom ICP-MS-a ; (3) analiziranja proteinskih frakcija dobivenih dvodimenzionalnim frakcioniranjem, koje sadrže metale Zn, Cu i Cd, pomoću masene spektrometrije (ESI-Q-TOF MS) s ciljem potvrđivanja prisutnosti MT. Primijenjeni analitički pristup omogućio je identifikaciju MT u proteinskim frakcijama citosola jetre klena koje sadrže Zn, Cu i Cd, što je u skladu s ulogom MT u homeostazi i detoksikaciji metala. Analitički pristup koji se zasniva na kombiniranoj primjeni različitih analitičkih metoda, poput dvodimenzionalnog razdvajanja proteina (SE-AEX-HPLC) povezanog s određivanjem metala (ICP-MS) i identifikacijom proteina (ESI-MS) predstavlja brz, osjetljiv i pouzdan alat za prepoznavanje citosolskih proteina koji vežu metale.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Geologija, Kemija, Biologija

Napomena
USB

POVEZANOST RADA