Naslov
Uloga dipeptidil-peptidaza 8 i 9 u pokusnom modelu Crohnove bolesti u CD26 deficijentnom mišu
(The role of dipeptidyl-peptidases 8 and 9 in an experimental model of Crohn's disease in CD26 deficient mice)

Autori
Buljević, Sunčica

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Rijeka

Datum
28.06

Godina
2016

Stranica
139

Mentor
Varljen, Jadranka

Ključne riječi
Crohnova bolest, dipeptidil-peptidaza IV/CD26, dipeptidil-peptidaza 8 ; dipeptidil-peptidaza 9, peptid YY, pokusni model kolitisa, supstanca P.
(Crohn's disease, dipeptidyl peptidase IV, dipeptidyl peptidase 8, dipeptidyl peptidase 9, experimental model of colitis, peptide YY, substance P.)

Sažetak
Crohnova bolest (CB) kronična je i nekontrolirana upala crijeva koja se razvija kao neadekvatan imunosni odgovor na neki od okolišnih čimbenika u genski podložnoj osobi. Dipeptidil-peptidaza IV/CD26 (DPP IV/CD26) svojim je proteolitičkim učincima na širok spektar imunomodulacijskih supstrata i kostimulacijskom funkcijom uključena u patogenezu CB, no uloga srodnih proteina, dipeptidil-peptidaza (DP) 8 i 9 nije još razjašnjena. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati utjecaj razvoja pokusnog modela kolitisa na lokalne i sistemske promjene genskog i proteinskog izražaja ovih enzima i njihovih susptrata, peptida YY (PYY) i susptance P (SP) čija je uloga u CB također indicirana. U CD26 deficijentnim (CD26-/-) i C57BL/6 miševima izazvan je TNBS-kolitis, a miševi su žrtvovani 2. (upala), 7. (cijeljenje). i 20. (oporavak) dana nakon tretmana. Praćene su kliničke promjene i tjelesna masa, a stupanj oštećenja debeloga crijeva određen je patohistološkom i histomorfometrijskom analizom. Transkripcijska aktivnost gena za DP8, DP9, DPP IV/CD26, PYY i SP određena je u debelome crijevu qPCRom, a proteinski izražaj ELISA testovima u debelome crijevu i serumu. DPP IV/CD26-slična i DP8/9 enzimska aktivnost određene su spektrofotometrijski u debelome crijevu i serumu uz upotrebu inhibitora DP8/9 odnosno DPP IV/CD26. Na temelju kliničkih parametara, gubitka mase, hepatosomatskog indeksa i značajnog skraćenja crijeva u miševima žrtvovanima 2. dana te karakterističnih patohistoških promjena, zaključeno je da oba soja miševa razvijaju TNBS-kolitis. Izražaj mRNA DPP IV/CD26, DP8 i DP9 u CD26-/- miševima nije značajno varirao u upali, dok je u C57BL/6 miševima 2. dana uočeno smanjenje DP9, a 7. dana DP8 (P < 0, 05). Crijevna koncentracija DP8 i DP9 značajno je veća (P < 0, 05) u CD26-/- miševima, čime se potvrđuje hipoteza o up- regulaciji, no u C57BL/6 miševima rezultira većom promjenom u upalnom stanju. Suprotno očekivanjima, u serumu je izmjerena značajna koncentracija intracelularnih DP8 i DP9, a u crijevu DP8/9 aktivnost koja se smanjuje 2. dana. Aktivnost i izražaj DPP IV/CD26 smanjeni su u upali i lokalno i sistemski, što je u skladu s prethodnim istraživanjima. Obrazac promjene transkripcijske aktivnosti gena za PYY 2. dana različit je među sojevima, dok se SP povećava u oba. Koncentracija PYY i SP u crijevu slijedi promjene na genskoj razini, a TNBS-kolitis jače je utjecao na promjenu sistemske SP. TNBS-kolitis uzrokuje promjene u genskom i proteinskom izražaju DP8 i DP9 na lokalnoj i sistemskoj razini čime se može zaključiti da su ove molekule uključene u procese nastanka upale i/ili cijeljenja crijevne sluznice, osobito u odsustvu DPP IV/CD26.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA