Naslov
Ispitivanje genotoksičnosti klorpirifosa, imidakloprida i alfa cipermetrina komet i komet-FISH testom na produženim kulturama limfocita čovjeka
(Genotoxicity of chlorpyrifos, imidacloprid and alpha cypermethrin determined by comet ii comet-FISH test for extended human lymphocyte cultures)

Autori
Vinković, Benjamin

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
16.09

Godina
2016

Stranica
37

Mentor
Šegvić Klarić, Maja

Neposredni voditelj
Želježić, Davor

Ključne riječi
Pesticidi; limfociti; komet test; komet-FISH test
(Pesticides; lymphocytes; comet test; comet-FISH test)

Sažetak
Insekticidi su u današnje vrijeme neizostavan dio uzgoja hrane kojima je kroz tu hranu izložena cjelokupna populacija. Stoga je bitno saznati kakve učinke te tvari imaju na ljudski organizam i zdravlje i odrediti regulativu koja će najbolje izbalansirati moguće štetne posljedice i uporabu insekticida. Jedan od bitnih učinaka je genotoksičnost koja se može pokušati odrediti raznim metodama poput ovdje korištenih komet i komet-FISH testova. Komet test je u biti alkalna elektroforeza nukleoida DNA pojedinačnih stanica u gelu gdje se oštećenja na molekuli DNA očituju kao 'repovi' a očitavanjem dužine i intenziteta repa možemo saznati opću razinu oštećenja molekule DNA. Stanice korištene za eksperiment su bile produžene stanice limfocita iz čovjeka. Ta metoda se već dugo vremena koristi u određivanju genotoksičnosti tvari, ali iako je dosta osjetljiva govori nam samo o općem stanju cjelokupne molekule DNA. Kako bi se dobio uvid u oštećenja specifičnih gena ili struktura molekule DNA primjenio se komet-FISH test. To je kombinacija komet testa s fluorescentnom in-situ hibridizacijom pri čemu određeni slijed molekule DNA obilježimo fluorescentnom bojom pri čemu dobijemo probu koju možemo hibridizirati s nukleoidom u dobivenom kometu čime možemo vidjeti smještaj i izgled promatranog gena kao fluorescentnog signala u sklopu kometa. Nažalost unatoč mogućnosotima koje nudi ova metoda nije korištena u puno radova istraživanja zbog čega je bitan ovakavovaj diplomski rad predstavlja značajan doprinos rad kako bi sesaznanjima saznalo više o metodi i imali rezultati za usporedbugenotoksičnom učinku ispitivanih insekticida. Nakon dugotrajnog (14 dana) izlaganja limfocita izabranim insekticidima – klorpirifosa, imidakloprida i alfa cipermetrina – u malim koncentracijama (ADI, REL, OEL) i kontrolnim supstancama spojevima, izmjerila se dužina i intenzitet repa kometa te odredili je određen broj delecija i migracija ciljanog gena u kometima. Nakon statističke obrade nismo ustanovili ikakveNije pokazana statistički značajne značajna razlika u vrijednosti komet niti komet-FISH testa nakon tretiranja stanica odabranim insketicidima u usporedbi s kontrolnim supstancama. Razmatranjem dostupnih literaturnih podataka Nakon usporedbe prijašnjih radova s ovim radom došli smo do zaključka da ukoliko se insekticidi koriste ispravno i u propisanim dozama ne bi trebalo doći do štetnih posljedica.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija, Temeljne medicinske znanosti, Farmacija

POVEZANOST RADA