Naslov
Utjecaj bjelančevine toplinskog šoka 70 i glikoproteina 96 na sazrijevanje decidualnih CD1a+ dendritičkih stanica prvog tromjesečja trudnoće
(The influence of heat schock protein 70 and glycoprotein 96 on maturation program of decidual CD1a+ dendritic cells in the first trimester of pregnancy)

Autori
Gulić, Tamara

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Rijeka

Datum
17.12

Godina
2014

Stranica
159

Mentor
Akademik Rukavina, Daniel ; Laškarin, Gordana, prof. dr. sc.

Ključne riječi
bjelančevine toplinskog šoka; CD91; decidua; Toll-like receptor 4; trofoblast; trudnoća
(CD91; decidua; Heat schock proteins; pregnancy; Toll like receptor 4; trophoblast)

Sažetak
Cilj istraživanja: Bjelančevine toplinskog šoka su visoko očuvane i ubikvitarne molekule prisutne unutar stanice na majčino-fetalnom spoju. Tijekom implantacije dolazi do opsežne tkivne pregradnje, pri čemu se u izvanstanični prostor mogu otpustiti bjelančevine toplinskog šoka. Snažno imunogeno djelovanje ovih bjelančevina može postati okidač za aktivaciju pro-upalnog imunološkog odgovora te prijetnja održavanju trudnoće. Cilj ovog rada bio je utvrditi obrazac izražaja bjelančevina toplinskog šoka 70 i gp96 (od engl. glycoprotein 96) te njihovih receptora CD91 i TLR4 (od engl. Toll Like Receptor 4) na mjestu prodora trofoblasta u decidualno tkivo prvog tromjesečja normalne i patoloških trudnoća (anembrijska trudnoća i zadržani pobačaj) te tkiva posteljice na terminskoj trudnoći. Nadalje, ispitati mehanizme nadziranja izražaja bjelančevina toplinskog šoka (HSP70 i gp96) i njihovih receptora CD91 i TLR4 pod utjecajem PIBF-a (od engl. Progesterone Induced Blocking Factor) i proupalnih citokina (IL-15 i IL-2). Također, proučiti utjecaj HSP70 i gp96 na fenotip i funkciju decidualnih CD1a+ dendritičkih stanica in vitro. Materijal i metode: Raspodjela Hsc70, Hsp70, gp96, CD91 i TLR4 u decidualnom tkivu prvog tromjesečja normalne i patoloških trudnoća te tkiva posteljice na terminskoj trudnoći uklopljenih u parafin ispitana je metodama imunohistologije i imunofluorescencije. Enzimskom razgradnjom tkiva i centrifugiranjem na gradijentu gustoće izdvojene su decidualne mononuklearne stanice (DMS) i analiziran je utjecaj rastućih koncentracija PIBF-a, IL-15 i IL-2 na izražaj HSP70, gp96, CD91 i TLR4 protočnom citometrijom i RT-qPCR metodom. Vezanje HSP70 i gp96 za receptore CD91 i TLR4 na CD1a+ DS dokazano je testom specifičnog vezanja. Ispitan je utjecaj HSP70 i gp96 na fenotip, stupanj sazrijevanja, unutarstanično izražavanje citokina i kemokina u decidualnim CD1a+ DS protočnom citometrijom nakon 18-sati stimulacije in vitro. Rezultati: Hsc70, Hsp70, gp96, CD91 i TLR4 prisutni su u uzorcima decidualnog tkiva prvog tromjesečja zdrave i patoloških trudnoća te tkiva posteljice na terminskoj trudnoći i to posebno u žljezdanom epitelu, endotelu kapilara, stanicama raspršenim u stromi decidue i stanicama trofoblasta. Pod utjecajem PIBF-a dolazi do smanjenja izražaja HSP70, gp 96, CD91 i TLR4 na razini gena i bjećančevina u suspenziji DMS. Citokini, IL-2 i IL-15 smanjuju izražaj gRNK za HSP70, CD91 i TLR4, dok povećavaju izražaj gRNK za gp96. IL-2 također smanjuje udio CD91+ i TLR4+ stanica u različitim staničnim subpopulacijama DMS-a. IL-15 povećava udio CD91+ stanica NK, ali smanjuje udio TLR4+ stanica NK, limfocita T, nezrelihi zrelih DS. HSP70 i gp96 specifično se vežu za CD91 i TLR4 na decidualnim CD1a+ DS. Pod utjecajem HSP70 i gp96 nezrele CD1a+ DS povećavaju izražaj CD83, HLA-DR, kostimulacijskih molekula (CD80 i CD86) te kemokina (CCL3 i CCL22) i citokina (IFN-γ i IL-15). Zaključak: Bjelančevine toplinskog šoka (HSP70 i gp96) i njihovi receptori (CD91 i TLR4) su prisutni na majčino-fetalnom spoju tijekom prvog tromjesečja zdrave i patoloških trudnoća te u tkivu posteljice na terminskoj trudnoći, što predstavlja molekulsku osnovu za njihovo međudjelovanje. Intenzitet izraženosti ovih molekula mogla bi biti posljedica složenih međuodnosa PIBF-a, IL-15 i IL-2. U pokusima in vitro, HSP70 i gp 96 kao prirodni ligandi za CD91 i TLR4 potiču sazrijevanje i aktivaciju CD1a+ DS sa stvaranjem pretežno pro-upalnih medijatora, što može podržati štetan imunološki odgovor i nepovoljan ishod trudnoće.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA