Naslov
Izražaj gena Stam2 određen na miševima preinačenim genskom zamkom.
(Stam2 gene expression in mice modified by gene trap method)

Autori
Ćurlin, Marija

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
27.11

Godina
2006

Stranica
106

Mentor
Gajović, Srećko

Ključne riječi
Stam2; izdražaj gena; genska zamka; miš
(Stam2; gene expression; gene trap; mouse)

Sažetak
Prijenos podražaja i njegova regulacija pomoću endocitoze i razgradnje receptora u lizosomima važni su procesi u embrionalnom razvoju sisavaca, te u razvoju i normalnom funkcioniranju živčanog sustava. STAM2 je bjelančevina smještena na ranim endosomima, te postoje dokazi da sudjeluje u razvrstavanju receptora namijenjenih razgradnji u lizosomima. Cilj rada bio je odrediti područja izražaja gena Stam2 praćenjem aktivnosti enzima ß-galaktozidaze na zamecima i mozgovima odraslih miševa linije Stam2Gt1Gaj i time dobiti nove spoznaje o njegovoj mogućoj ulozi u razvoju mišjih zametaka i funkcioniranju središnjeg živčanog sustava odraslih miševa. Mišja linija Stam2Gt1Gaj dobivena je postupkom genske zamke gdje vektor pKC199ßgeo ugradnjom u gen Stam2 onemogućuje stvaranje, a time i funkcioniranje normalne bjelančevine STAM2. Vektor genske zamke sadrži gen za ß-galaktozidazu bez vlastitog promotora, pa se praćenjem aktivnosti ß-galaktozidaze može odrediti izražaj gena Stam2. Analiza preinačenog gena Stam2, te njegovih transkripata i bjelančevine STAM2, pokazala je da preinačeni gen daje promijenjeni transkript od kojeg nastaje stopljena bjelančevina s aktivnošću ß-galaktozidaze, te da se tijekom transkripcije događa alternativno prekrajanje gena Stam2, koje ne uzrokuje stvaranje bjelančevine STAM2. Normalni transkript gena Stam2 prisutan je u svim ispitivanim organima odraslog miša divljeg tipa. Izražaj Stam2 određen histokemijskim bojanjem na ß-galaktozidazu vidljiv je između razvojnih stadija E9, 5 i E18, 5 u primitivnom stražnjem crijevu, osnovi središnjeg živčanog sustava i srcu, te pred kraj gestacijskog razdoblja u organima endokrinog sustava i pokrovnom epitelu zametaka. U mozgu novorođenih kao i odraslih miševa Stam2 je intenzivno izražen na području kore velikog mozga, hipokampusa i olfaktornih bulbusa, a vidljiv je i u jezgrama sive tvari velikog mozga, te kori malog mozga. Rezultati ovog istraživanja ukazuju na moguću ulogu STAM2 u razvoju živčanog sustava, srca, endokrinih žlijezda i epitelnih tkiva, te da bi ta uloga mogla biti povezana s ulogom STAM2 u regulaciji prijenosa podražaja pomoću endocitoze.

Izvorni jezik
Hrvatski

POVEZANOST RADA