Naslov
Utjecaj UV zračenja na proteine Bcl-2 i Bax u kulturi mišjih embrionalnih fibroblasta
(The effect of UV irradiation on Bcl-2 and Bax proteins in mouse embryonic fibroblast culture)

Autori
Džinić, Tamara

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
09.05

Godina
2012

Stranica
32

Mentor
Marijanović, Inga

Neposredni voditelj
Josipović, Pavle

Ključne riječi
UV zračenje; apoptoza; FADD
(UV radiation; apoptosis; FADD)

Sažetak
UV zračenje je potencijalni karcinogen koji potiče apoptozu preko membranskih receptora smrti ili aktivacijom unutarnjeg puta apoptoze. Onkogeni potencijal Bcl-2 povezan je s njegovom sposobnošću da inhibira apoptozu induciranu UV zračenjem u različitim tipovima stanica. Obitelj proteina Bcl-2 sadrži antiapoptotske (Bcl-2, Bcl-XL, Bcl-w, Bfl-1, Brag-1, Mcl-1, A1) i proapoptotske (Bax, Bak, Bcl-XS, Bad, Bid, Bik, Hrk) članove, a njihov omjer unutar stanice određuje hoće li apoptoza biti inducirana ili spriječena. Bcl-2 spriječava ključni događaj u mitohondrijskom putu apoptoze, oslobađanje citokroma c iz intermembranskog prostora. Istraživanja su pokazala da UV zračenje smanjuje ekspresiju Bcl-2 u normalnim stanicama kože kao i u fibroblastima s deficijentnim popravkom DNA. Protein Bax translocira iz citosola na membranu mitohondrija za vrijeme apoptoze inducirane UV- zračenjem. U ovom istraživanju želimo utvrditi utjecaj UVB zračenja na mišje embrionalne fibroblaste divljeg tipa i ispitati uključenost unutarnjeg puta apoptoze detekcijom proteina Bcl-2 i Bax te odrediti promjene u količini tih proteina u slučajevima kad je inhibiran vanjski put apoptoze i programirana nekroza. U pokusima će biti korišteni mišji embrionalni fibroblasti divljeg tipa i mišji fibroblasti bez FADD proteina (FADD-/-), a pokusi će uključivati tretman stanica UV-B zračenjem od 600 J/m2 sa i bez nekrostatina-1. Nekrostatin-1 inhibira RIP-1 kinazu u nekroptozi koja predstavlja regulirani proces nakon aktivacije receptora smrti. Apoptoza će se određivati TUNEL metodom na fluorescencijskom mikroskopu i protočnom citometru, a detekcija proteina Bcl-2 i Bax bit će rađena Western blot analizom.

Izvorni jezik
Engleski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA