Pregled bibliografske jedinice broj: 64635
Genotipizacija CYP2D6 *3 i *4 mutacija metodom PCR-SSCP
Genotipizacija CYP2D6 *3 i *4 mutacija metodom PCR-SSCP // Biochemia Medica, Sažeci Trećeg hrvatskog kongresa medicinskih biokemičara / Suchanek, Ernest (ur.).
Zagreb: Hrvatsko društvo za medicinsku biokemiju i laboratorijsku medicinu (HDMBLM), 1999. str. 52-3 (poster, domaća recenzija, sažetak, znanstveni)
CROSBI ID: 64635 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
Genotipizacija CYP2D6 *3 i *4 mutacija metodom PCR-SSCP
(PCR-SSCP genotyping of CYP2D6 *3 and *4 mutations)
Autori
Ivanišević, Ana-Maria ; Štefanović, Mario ; Topić, Elizabeta
Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni
Izvornik
Biochemia Medica, Sažeci Trećeg hrvatskog kongresa medicinskih biokemičara
/ Suchanek, Ernest - Zagreb : Hrvatsko društvo za medicinsku biokemiju i laboratorijsku medicinu (HDMBLM), 1999, 52-3
Skup
Treći hrvatski kongres medicinskih biokemičara
Mjesto i datum
Vukovar, Hrvatska, 22.09.1999. - 25.09.1999
Vrsta sudjelovanja
Poster
Vrsta recenzije
Domaća recenzija
Ključne riječi
CYP2D6; *3 and *4 mutations; PCR-SSCP
(CYP2D6; mutacije *3 i *4; PCR-SSCP)
Sažetak
Single-Strand Conformation Polymorphism (SSCP) je metoda detekcije poznatih i nepoznatih mutacija koja se temelji na promjeni sekundarne strukture definiranog fragmenta jednolančane DNA.
Cilj ovog rada je bio optimirati PCR-SSCP metodu detekcije CYP2D6 *3 and *4 mutacija korištenjem GMA gelova u Elchrom Scientific SEA 2000 elektroforetskom sustavu, opremljenim elementom za izmjenu topline i pumpom za laminarni protok, koji omogućuju održavanje jednolične temperature po čitavoj površini gela.
PCR-SSCP analiza je izvedena na 45 uzoraka prethodno genotipiziranih metodom PCR-RFLP. Eksoni IV i V (*4 i *3 aleli) CYP2D6 gena su umnoženi i denaturirani na 95°C, 5 minuta. Napon je bio 45 V, a temperatura pufera 8°C tijekom noći (18 h).
Naši rezultati pokazuju reproducibilne i uniformne obrasce vrpci na gelu za mutante i divlje tipove CYP2D6 *3 and *4 genotipova. Unutar skupine zdravih ispitanika za CYP2D6 *3 je pronađeno 2.0 % heterozigota i 98 % divljeg tipa, a za CYP2D6 *4 68.2 % divljeg tipa, 29.5 % heterozigota i 2.3 % homozigota. Svaki uzorak prethodno genotipiziran metodom PCR-RFLP jednoznačno je potvrđen metodom PCR-SSCP (100 % podudarnost). Zbog odličnih značajki GMA gelova i mogućnosti kontrole temperature u Elchrom Scientific SEA 2000 elektroforetskom sustavu metoda je pouzdana, jednostavna za izvođenje i ekonomski konkurentna.
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti
