Naslov
Genetička analiza supresorske mutacije u mutantu recC73 bakterije Escherichia coli
(Genetic analysis of recC73 suprresor mutation in Escherichia coli)

Autori
Sumpor, Danijel

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
09.07

Godina
2013

Stranica
38

Mentor
Ivančić Baće, Ivana

Neposredni voditelj
Majsec, Kristina

Ključne riječi
RecBCD; recC73; homologna rekombinacija; E. coli
(RecBCD; recC73; homologous recombination; E. coli)

Sažetak
U bakteriji Escherichia coli, enzim RecBCD zadužen je za obavljanje nekoliko važnih uloga u metabolizmu DNA. Enzim se sastoji od 3 podjedinice nazvane RecB, RecC i RecD koje zajedno čine holoenzim RecBCD. Svaka od podjedinica ima svoju karakterističnu ulogu, na temelju kojih holoenzim u cjelini može djelovati kao helikaza i nukleaza te imati sposobnost prepoznavanja Chi mjesta unutar DNA sekvence. Poznati su brojni mutanti enzima RecBCD koji ovisno o mjestu mutacije mijenjaju funkciju samog proteina pri čemu dolazi do promjene neke ili svih aktivnosti koje enzim obavlja. Mutant recC73 spada u takozvane null mutante jer je rekombinacijski deficijentan, nema nukleaznu aktivnost i ne može prepoznati Chi mjesto (Rec- Chi- Nuc-). Ustanovljeno je da mutacija recC73 predstavlja deleciju T na 1938 mjestu unutar gena recC uslijed čega dolazi do sinteze nekoliko pogrešnih aminokiselina i preuranjene terminacije translacije i sinteze krnjeg proteina RecC73. Supresorska mutacija, koja je nađena u promotorskoj regiji gena recC, je „poboljšavajuća“ mutacija koja uzrokuje pojačano prepisivanje ovog gena i povećanu količinu proteina RecC73. U ovom radu genetički je analizirana supresorska mutacija u mutantu recC73. Metodom qRT-PCR, pokazali smo da je količina transkripata za gen recC u suprimiranom mutantu recC73 povećana u originalni mutant recC73. Povećana ekspresija alela recC73 s plazmida mogla je suprimirati recC null mutaciju slično kao promotorska mutacija, dok povećana ekspresija ili gena recB ili recD s plazmida nije mogla suprimirati mutaciju recC73. Dobiveni rezultati potvrdili su da zbog povećane transkripcije alela recC73 može doći do djelomične supresije recC73 null mutacije te ukazuju da podjedinica RecC ima ključnu ulogu u sastavljanju enzima RecBCD.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA