ࡱ> Z]WXYbjbj 7TF F A<Bf}n> nApApApApApApACFTpAnnpAQB&?&?&?: nA&?nA&?&?&?PKb a)&?ZAgB0B&?F<F&?F&?4&?pApA>BFF O:Kvaliteta kukuruzne sila~e s obiteljskih poljoprivrednih gospodarstava Koprivni ko-kri~eva ke ~upanije tijekom 2012. godine Manuela Zadravec, Marija Duvnjak, Jelka Pleadin, Kristina Kljak, Vesna Jaki Tkalec, Darko Majneri, Mario Mitak UVOD Kukuruz (Zea mays L.) je trea svjetska ~itarica nakon paenice i ri~e. Zbog svog niskog pufernog kapaciteta, visoke suhe tvari i optimalne koncentracije topivih ugljikohidrata (Nkosi i sur., 2009) sila~a cijele biljke kukuruza danas predstavlja najva~niju sila~nu kulturu u Republici Hrvatskoj i diljem svijeta. Siliranje je proces anaerobnog konzerviranja voluminozne krme mlije no kiselinskom fermentacijom ime se smanjuje mogunost gubitka hranjivih tvari od ~etve do konzumacije krme (Fulgueira i sur., 2007; Seglar, 2003). Osnovni koraci u procesu siliranja su: brza uspostava anaerobnih uvjeta, brza proizvodnja mlije ne kiseline i brzi pad pH te odr~avanje anaerobnih uvjeta prilikom skladiatenja i koriatenja sila~a (Kung, 2001). Anaerobni uvjeti i brza produkcija mlije ne kiseline, koja brzo sni~ava pH vrijednost sila~e, inhibiraju aktivnost nepo~eljnih mikroorganizama (kvasaca, plijesni, enterobakterija i klostridija) uzro nika kvarenja sila~e. Ukoliko se pH ne smanji dovoljno brzo, nepo~eljni mikroorganizmi e nastaviti svoju aktivnost te e se time smanjiti vjerojatnost proizvodnje stabilne i kvalitetne sila~e (Fulgueira i sur., 2007; Meeske 2005). Uz mlije nu kiselinu, bakterije mlije ne kiseline fermentacijom vodotopivih ugljikohidrata stvaraju i octenu kiselinu, dobar inhibitor kvasaca. Takoer, u tragovima je joa mogua prisutnost masla ne i propionske kiseline, koje su netipi ni produkti fermentacije sila~a i esto su povezane s procesom kvarenja sila~a (Kung i Stokes, 2001). Kvarenje sila~e je posljedica aerobnih uvjeta u sila~i (Reis, 2005), ato dovodi do razgradnje mlije ne kiseline od strane kvasaca i nekih bakterija. Manuela ZADRAVEC dr.med.vet., dr.sc. Jelka PLEADIN, dipl. ing. biotehnol., znanstvena savjetnica, dr. sc. Mario MITAK, znanstveni savjetnik, Hrvatski veterinarski institut, Zagreb; Marija DUVNJAK dipl.ing.bioteh., dr.sc. Kristina KLJAK dipl. ing.kem. , Agronomski fakultet, Zagreb; Vesna JAKI TKALEC dr.med.vet., dr.sc. Darko MAJNARI, znanstveni suradnik Razgradnjom mlije ne kiseline dolazi do rasta pH sila~e prema neutralnom podru ju ato za posljedicu ima veu aktivnost mikroorganizama odgovornih za kvarenje sila~e. Kvarenje sila~a dovodi do gubitka hranjivih tvari te zagrijavanja sila~e i produkcije nepo~eljnih produkata (masla ne kiseline, etanola, amonijaka, slobodnih amina i amida) (Filya, 2003; Seglar, 2003). Pravilna priprema, skladiatenje i klasifikacija, osnovni su preduvjeti za optimalno koriatenje sila~a u hranidbi pre~iva a. Meutim, sila~a je istovremeno izrazito varijabilna u svojim karakteristikama zbog mnogih imbenika koji mogu utjecati na kvalitetu procesa siliranja. Upravo zbog navedenog razloga, cilj ovog istra~ivanja je bio napraviti screening fermentacijskih i mikrobioloakih karakteristika kvalitete sila~a, proizvedenih u razli itim uvjetima na obiteljskim gospodarstvima Koprivni ko-kri~eva ke ~upanije MATERIJAL I METODE Biljni materijal Tijekom sije nja i velja e 2012. godine na obiteljskim poljoprivrednim gospodarstvima s podru ja Koprivni ko-kri~eva ke ~upanije sakupljen je 31 uzorak kukuruzne sila~e. Uzorkovanje i priprema uzorka za analizu provedeni su u skladu s normama ISO 6497:2002 i ISO 6498:1998 . Mikrobioloaka analiza Za odreivanje ukupnog broja bakterija u gramu koriatena je metoda u skladu s normom HRN EN ISO 4833:2003. U 20g usitnjene sila~e dodano je 180 ml PPV + Tween 80 (Merck, Njema ka) te homogenizirano u stomaheru (Bag Mixer, Interscience, Francuska) kroz 3 minute. Tako dobiveno inicijalno razrjeenje razrijeeno je u koncentracijskom rasponu od 10-1 do 10-10. Od svakog razrjeenja u duplikatu odpipetiran je 1ml alikvota u Petrijevu zdjelicu koja je potom zalivena s 12-15 ml Plate count agar-a (PCA) (Merck, Njema ka). Inokulum s agarom pa~ljivo je promijeaan rotiranjem zdjelice po podlozi i inkubiran kroz 723 h u aerobnim uvjetima na 30C (1C). Nakon predvienog vremena inkubacije izbrojane su porasle kolonije na agaru i utvren je broj bakterija u gramu. Broj kvasaca i plijesni odreen je u skladu s normom ISO 21527-2:2008. Inicijalno razrjeenje i niz razrjeenja napravljeni su na isti na in kao i kod odreivanja ukupnog broja bakterija u gramu. Alikvot od 0,1 mL niza razrjeenja otopine nacijepljen je na DG 18 agar (Merck, Njema ka) i ravnomjerno razmazan L-atapiem po povraini agara. Inokulirane plo e inkubirane su kroz 5 dana na 25C (1C) u aerobnim uvjetima nakon ega su izbrojane porasle kolonije kvasaca i plijesni te je odreen njihov broj u gramu. Kemijska analiza Odreivanje kiselina Po modifikaciji Flieg metode (Balzer, 1961) u odmjernu tikvicu od 1L stavljeno je 100 g sila~e, dodano 1 mL formaldehida i dopunjeno vodom do oznake. Promukano je viae puta i ostavljeno stajati preko noi te je sadr~aj filtriran preko nabranog filtar papira. Od filtrata je uzeto 200 mL, dodano 20 mL vapnenog mlijeka i 10 mL otopine bakrenog sulfata te ostavljeno stajati 1 sat. Sadr~aj je potom dopunjen do oznake i filtriran preko nabranog filtar papira. Odreivanje octene i masla ne kiseline: 200 mL bistrog filtrata stavljeno je u tikvicu zajedno sa 5 mL sumporne kiseline (1+1) te priklju eno na destilacijsku cijev. Destilacijski postupak proveden je tako da je tijekom 20 min od prve kapi predestilirano 100 mL, a tijekom daljnjih 10 min 50 mL. Odreivanje mlije ne kiseline: U ostatak od 55 mL dodano je 55 mL otopine kromsumporne kiseline te uz povratno hladilo od po etka vrenja kuhano 5 min. Potom je kroz hladilo dodano 100 mL vode i predestilirano 50 mL preko prve destilacijske aparature. Tri dobivena destilata titrirana su sa 0,05 M NaOH do slabo crvene boje uz fenolftalein kao indikator. Titracijske vrijednosti pomno~ene su sa 1,25 s obzirom na napravljeno razrjeenje. Rezultati su odreeni ra unskim putem i izra~eni kao postotci mlije ne, octene i masla ne kiseline, a temeljem tabli nih podataka izvraeno je bodovanje te ocjena sila~e. Odreivanje pH vrijednosti pH vrijednost izmjerena je pH metrom (MP220, Mettler Toledo) uz pripremu 100 g uzorka sila~e i dodatak 1000 mL destilirane vode. Statisti ka analiza Korelacija karakteristika kvalitete istra~ivanih sila~a ispitana je upotrebom CORR procedure SAS statisti kog paketa (Statistical Analysis System, 2003). Statisti ka signifikantnost bila je postignuta uz uvjet Pd"0,05. REZULTATI I RASPRAVA Silirana voluminozna krma esto sadr~ava viae od 50% suhe tvari obroka mlije nih krava (Seglar, 2003), stoga kvaliteta silirane krme ima va~an utjecaj na koli inu i kvalitetu mlijeka. Openito je kontrola kvalitete sila~a va~an dio hranidbenog programa mlije nih farmi. U provedenom istra~ivanju pratila se kvaliteta sila~a kukuruzne biljke u upotrebi, na domainstvima u Koprivni ko-kri~eva koj ~upaniji, tijekom sije nja i velja e 2012. godine. Obzirom da je cilj ovog istra~ivanja bio vezan uz screening sila~a u upotrebi za navedeno razdoblje, podaci o dodavanim aditivima ili adsorbensima, kao ni o trajanju perioda izuzimanja sila~a nisu uzimani. Od pokazatelja kvalitete fermentacije, odreena je pH vrijednost (Tablica 1) i omjer fermentacijskih kiselina prema Fliege-u (Tablica 2), a od mikrobioloakih pokazatelja kvalitete fermentacije odreene su ukupne bakterije i ukupni kvasci/plijesni (Tablica 3). Tablica 1. Rezultati osnovnih fermentacijskih parametara 31 uzorka kukuruzne sila~e UZORAK pHUkupne kiseline g/kg svje~eg uzorkaOmjer mlije na/octena kiselina14,1343,711,924,0852,821,234,2127,531,244,3829,982,257,1122,690,366,6222,110,277,0923,210,083,7430,104,193,9258,972,1104,1236,630,7113,9948,162,6123,8238,135,5133,8744,181,9146,3726,460,4153,9141,031,8164,2628,142,1174,0117,701,6186,35,960,7193,9428,284,1203,8229,784,0213,9764,905,1224,0333,934,5233,7736,634,1244,2139,584,0254,0359,534,9264,1822,203,2274,237,042,8283,9457,772,5294,1632,654,9305,7211,191,9314,336,782,6 pH vrijednost se uobi ajeno smatra brzim pokazateljem kvalitete fermentacije, jer jednostavnom i jeftinom analizom, koja se mo~e provesti na farmi, mo~e ukazati na dobru ili loau fermentaciju. U analiziranim kukuruznim sila~ama pH se kretao u rasponu od 3,74 do 7,11, od ega je veina imala pH ni~i od grani nog pH 4,2, a ato pokazuje da je kukuruzna sila~a uglavnom bila dobro silirana prema ovom pokazatelju kvalitete siliranja. Kvalitetno silirana sila~a kukuruza ima pH izmeu 3,7 i 4,2, uz iznimke do 4,5 ukoliko je rije  o sila~i vla~nog zrna kukuruza (Kung, 2001; Kung i Stokes, 2001). Visoke vrijednosti pH su pokazatelj loae fermentacije sila~e i/ili mogueg kvarenja sila~e. Pokvarene sila~e esto imaju pH iznad 7,5 (Kung i Stokes, 2001). Od svih kiselina koje nastaju fermentacijom prilikom siliranja, na pH najviae utje e sadr~aj mlije ne kiseline, ato se mo~e vidjeti i na primjeru analiziranih sila~a. S porastom sadr~aja mlije ne kiseline u ukupnim kiselinama istra~ivanih sila~a opada i pH vrijednost ato je potvrdila i negativna korelacija (-0.85, P<0.001) izmeu ova dva parametra. Tablica 2. Udjeli hlapivih u ukupnim kiselinama prema Fliege analizi u 31 uzorku kukuruzne sila~e UZORAKMlije na kiselina(%)Octena kiselina (%)Masla na kiselina (%) Ocjena po Fliegu163,3933,243,36dobra253,6246,380dobra354,3145,690dobra468,9831,020vrlo dobra524,4275,580zadovoljava618,0981,910zadovoljava73,8496,160zadovoljava880,5319,470vrlo dobra967,3232,680vrlo dobra1040,1959,810dobra1172,5727,431,35vrlo dobra1284,5315,470vrlo dobra1365,8234,180vrlo dobra1429,5270,480zadovoljava1564,0835,920vrlo dobra1668,0231,980vrlo dobra1762,2137,790vrlo dobra1840,7659,240dobra1980,3119,690vrlo dobra2079,8519,780vrlo dobra2183,5216,480vrlo dobra2281,8718,130vrlo dobra2380,4319,570vrlo dobra2479,5619,880vrlo dobra2583,0316,970vrlo dobra2675,9524,050vrlo dobra2773,8626,140vrlo dobra2871,6128,390vrlo dobra2983,1916,810vrlo dobra3065,6934,310vrlo dobra3172,2727,730vrlo dobra Udio mlije ne, octene i masla ne kiseline je glavni pokazatelj optimalnih uvjeta fermentacije. U optimalnim uvjetima udio mlije ne kiseline u ukupnim organskim kiselinama u sila~i ne bi trebao biti manji od 65-70% (Kung i Shaver, 2001). Dodatno, omjer mlije ne i octene kiseline je isto jednostavan i dobar pokazatelj kvalitete fermentacije sila~e. Od ukupnog broja analiziranih sila~a njih 35% je imalo optimalan odnos mlije ne i octene kiseline (Tablica 1), sa omjerom veim od 3:1 (Kung i Stokes, 2001). U uzorcima pod rednim brojem 5, 6, 7 i 14 dominantna je octena kiselina; ona je slabija kiselina od mlije ne kiseline te se pH vrijednost u navedenim sila~ama kretala oko 7. Posljedi no su takve sila~e svrstane po Fliegu u razred zadovoljavajuih sila~a koje su podlo~nije kvarenju nego li sila~e sa optimalnim sadr~ajem organskih kiselina (Tablica 2). Ujedno, rezultati iz Tablice 3. ukazuju na to da su u sila~ama 5, 6, 7 i 14 koncentracije kvasaca i plijesni vee od 105 CFU/g (log10 5 CFU/g) svje~e mase sila~e : 4 J t  "   $ 㼭vj^O^ChULCJOJQJaJhlhsCJOJQJaJhlCJOJQJaJhnCJOJQJaJhACJOJQJaJhlh96CJOJQJaJhlhNICJOJQJaJh9CJOJQJaJhlh9CJOJQJaJh2CJOJQJaJh;CJOJQJaJhjZhjZCJOJQJaJh_CJOJQJaJh?h_5CJOJQJaJ B dhgdi'$dh`a$gdNIgdNI dhgd dhgdjZ $dha$gdi$ hj24fT&(@Dtx־־־֣֜քxlxx]hlh@CJOJQJaJh 7.CJOJQJaJhACJOJQJaJhULCJOJQJaJh"CJOJQJaJ hULhULhM$CJOJQJaJhhCJOJQJaJhCJOJQJaJhCJOJQJaJhlh9CJOJQJaJhlCJOJQJaJhULhULCJOJQJaJ"$P  BfDTVXZtʻʠʠʠʔ֔օymfbShM$hM$CJOJQJaJh ~ h ~h ~h ~CJOJQJaJhlCJOJQJaJhlh{HCJOJQJaJhfsCJOJQJaJhlhi'CJOJQJaJhi'CJOJQJaJhp5hi'CJOJQJaJhi'CJOJQJaJhlh9CJOJQJaJhCJOJQJaJhlhn/CJOJQJaJt(HZ\* b ʾocWK?h(/CJOJQJaJhNICJOJQJaJh CJOJQJaJhlCJOJQJaJhfshs6CJOJQJaJh!CJOJQJaJhfsCJOJQJaJhlh{CJOJQJaJhFCJOJQJaJh|_KCJOJQJaJhCJOJQJaJhlh9CJOJQJaJh 7.CJOJQJaJh ~CJOJQJaJhM$h ~CJOJQJaJ """####H#J#L##$ $$$$$$8%%%%&&&&D&媞wwkw[[wh:ghM9CJH*OJQJaJhskCJOJQJaJh:gCJOJQJaJhFCJOJQJaJhFhFCJOJQJaJh?CJOJQJaJhFhM96CJOJQJaJhhM96CJOJQJaJhM9hNICJOJQJaJhM9CJOJQJaJhM9hM9CJOJQJaJh_CJOJQJaJ! ##J#L#H)J-L-N-p-r---413|5D8F8~889999d;f;gdNI dh`gd]$dh`a$gdNID&F&^&z&&)))<*F*n***H-J-L-N-p-r-----.///113235567B8D8F8b8z8|8~88ٱ~ٽٽٽٽٽrٱrٱ~h7CJOJQJaJh(ECJOJQJaJhM9hNICJOJQJaJh_CJOJQJaJhNICJOJQJaJhM9CJOJQJaJhskCJOJQJaJhhM96CJOJQJaJhM9hM9CJOJQJaJh:gCJOJQJaJhCJOJQJaJ*8999999B;R;`;b;d;h;;;;;<^<`<b<n<p<r<==>>V>>>???x??ʻ֯֯ʑʅʠʠ~whXh7hM96CJOJQJaJhT;~hM9CJOJQJaJ hT;~hM9 h YhM9h:gCJOJQJaJhxYh(ECJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJh7CJOJQJaJhM9hNICJOJQJaJhM9CJOJQJaJhM9hM9CJOJQJaJh(/CJOJQJaJh]h]CJOJQJaJ"f;h;;;BBdCfChCvCxC~CCD$d$Ifa$gd ^`gd $dh`a$gdNIgdNI ?????<@D@H@^@@@@@@AA0AFAHA~AAAABBBBBBDD"D&D4D8DFDJDXD\DjDnD|DDDDDDDDDDDDDD÷ҫ圉圉%h h B*CJOJQJaJphh h CJOJQJaJh(/CJOJQJaJhCJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJhM9CJOJQJaJ hT;~hM9h7CJOJQJaJhT;~hM9CJOJQJaJ6DDD DDDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDD"D&DJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(&D'D)D.D4D8DJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(8D9D;D@DFDJDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(JDKDMDRDXD\DJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(\D]D_DdDjDnDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(nDoDqDvD|DDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd$$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd $$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd $$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDDDJ9999$d$Ifa$gd kd $$Ifl\O  0n t0u44 lap(DDDDEEE%E)E8EO@OOPPPPQQ2Q4QjQlQQQQQ R R'R(RCRDR[R\R{R|RRRRRRRRR SS*S+SBSCS_S`S|S}SSSSSSSSپپhi2h TCJOJQJaJh h TCJOJQJaJh h CJOJQJaJhNICJOJQJaJh TCJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJhM9CJOJQJaJ?*OOOP*PRP~PPP$d$&`#$/Ifa$gdB ^`gd PP)kd$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2PPPPPP$d$&`#$/Ifa$gdBPP)kd$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2PPPPPQ$d$&`#$/Ifa$gdBQQ)kd $$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2Q QQ"Q&Q2Q$d$&`#$/Ifa$gdB2Q4Q)kd!$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap24Q8QDQPQTQjQ$d$&`#$/Ifa$gdBjQlQ)kd"$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2lQpQ|QQQQ$d$&`#$/Ifa$gdBQQ)kd$$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2QQQQQQ$d$&`#$/Ifa$gdBQQ)kd%$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2QQQQQ R$d$&`#$/Ifa$gdB R R)kd&$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2 RRRRR'R$d$&`#$/Ifa$gdB'R(R)kd"'$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2(R*R0R6R8RCR$d$&`#$/Ifa$gdBCRDR)kd+($$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2DRGRMRSRUR[R$d$&`#$/Ifa$gdB[R\R)kd4)$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2\R_ReRkRpR{R$d$&`#$/Ifa$gdB{R|R)kdC*$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2|RRRRRR$d$&`#$/Ifa$gdBRR)kdL+$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2RRRRRR$d$&`#$/Ifa$gdBRR)kdU,$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2RRRRRR$d$&`#$/Ifa$gdBRR)kd^-$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2RRRRRR$d$&`#$/Ifa$gdBRR)kdm.$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2RRRSS S$d$&`#$/Ifa$gdB SS)kdv/$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2SSSSS*S$d$&`#$/Ifa$gdB*S+S)kd0$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2+S.S4S:SUvUxU|UUUUU^VxWWWWVXXXZXY4Y8Y>YHYLYVYXYYYYY4ZZʾ|ʗʗʗmmh(hM9CJOJQJaJhCJOJQJaJhB9hM9CJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJhM9CJOJQJaJh.dCJOJQJaJh_CJOJQJaJh TCJOJQJaJh(/CJOJQJaJh h TCJOJQJaJhi2h TCJOJQJaJ*SSSTTT$d$&`#$/Ifa$gdBTT)kd8$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2T"T.T:T>TTT$d$&`#$/Ifa$gdBTTVT)kd9$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2VT\ThTtTxTT$d$&`#$/Ifa$gdBTT)kd:$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2TTTTTT$d$&`#$/Ifa$gdBTT)kd;$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2TTTTTU$d$&`#$/Ifa$gdBUU)kd<$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2U UU"U&UU)kd=$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2>UDUPU\U`UvU$d$&`#$/Ifa$gdBvUxUzU)$dh`a$gdNIkd?$$Iflr@ XTTT t 6`0 44 lap2zU|U~UUUUUUUUUUUUUUUUUUCKNNP^`gdNI$7dh`7a$gd@6$dh`a$gdNIZ<\T\X\f\\2]:]F]H]^]b]]>z>>>>>$?X?d?AADDDD8EFE~EEEEEEEEFF`FFFF~hhM9CJOJQJaJhM9CJOJQJaJhxYh@6CJOJQJaJh@6h@6CJOJQJaJUhxYhM9CJH*OJQJaJhxYhM9CJH*OJQJaJh@6CJOJQJaJhCJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJ+, a s obzirom da kvasci dodatno razgrauju mlije nu kiselinu, ove sila~e ini sklonijima zagrijavanju i nestabilnijima prilikom izuzimanja sila~a (Kung, 2001; Kung i Stokes, 2001). Dva uzorka kukuruzne sila~e, redni broj 1 i 11 imali su redom 3,36 i 1,35% masla ne kiseline. Prisutnost masla ne kiseline u uzorcima sila~a dokaz je sekundarne fermentacije klostridijama. Klostridije su jedne od naj eaih kontaminanata prisutnih u anaerobnim uvjetima u izrazito vla~nim sila~ama. One proizvode masla nu kiselinu i duai ne spojeve (amonijak, amine, amide) koji su rezultat sekundarne fermentacije i proteolize (Seglar, 2003). Posljedica toga su sila~e sa velikim gubicima suhe tvari, loaom konzumacijom i visokim udjelom atetnih spojeva, u prvom redu amonijaka. Mikroorganizmi iz carstva gljiva (kvasci i plijesni) kontaminirajui krmu mogu izlo~iti ~ivotinje, ali i ljude, razli itim bolestima (Gotlieb, 2002). U 32% sila~a utvren je broj kvasaca manji od 105 CFU/g (log10 5 CFU/g), dok su ostale sila~e imale viae od 105 CFU/g (log10 5 CFU/g). Prilikom izuzimanja sila~a sa brojem kvasaca veim od 105 CFU/g (log10 5 CFU/g) potreban je oprez kako ne bi u aerobnim uvjetima izuzimanja doalo do gubitaka organske tvari, poviaenja pH, zagrijavanja i rasta plijesni. Kvasci prethode pojavi plijesni u sila~i, jer plijesni ne mogu rasti pri pH ni~em od 4,5 (Seglar, 2003). Smatra se da su koncentracije plijesni vee od 106 CFU/g (log10 6 CFU/g) svje~e mase potencijalno atetne. Za plijesni su definirana etiri podru ja: d"103 CFU/g (log10 3 cfu/g) sigurno krmivo, 103-105 CFU/g (log10 3-5 CFU/g) tranzicijsko podru je, 105-106 CFU/g (log10 5-6 CFU/g) potreban je oprez, >106 CFU/g (log10 6 CFU/g) krmivo potencijalno nije za konzumaciju (Taysom, 2002). Od ukupnog broja sila~a, u njih 68% nisu odreene plijesni. Sila~e pod rednim brojem 14, 18 i 26 imale su zabrinjavajue visoki udio plijesni (>106 CFU/g). U ostalih pet sila~a u kojima su plijesni odreene, broj nije prelazio zabrinjavajuu granicu. Openito je preporuka da se u sila~ama u kojima je detektirana visoka prisutnost plijesni napravi analiza mikotoksina (Fulgueira i sur., 2007). Tablica 3. Rezultati mikrobioloake analize 31 uzorka kukuruzne sila~e sakupljanih sa obiteljskih poljoprivrednih gospodarstva u Koprivni ko-kri~eva koj ~upaniji UZORAKUBB1 log10 CFU/gKvasci i plijesni log10 CFU/gPrisutnost mikroorganizama iz carstva gljiva217,0003,301K27,3626,362K38,7569,000K410,4318,949K510,00010,146K610,0798,568K710,0798,898K86,3986,477K98,2045,845K106,3427,544K118,07910,531K126,5316,531K136,6726,041K1410,0007,602P/K155,9684,301K167,9593,000K178,1465,146P189,3988,914P198,0005,716K205,7165,602K217,1144,903K226,6434,301K236,3014,602K247,7994,978P257,1763,000K/P269,0416,041K/P276,9873,000K/P286,0793,000K/P298,3625,230P308,5195,949P317,7714,904K1UBB = ukupne bakterije; 2 kvasci=K i/ili plijesni=P Analizom povezanosti udjela mlije ne kiseline (Tablica 2) i mikrobioloakih rezultata (Tablica 3) utvrena je statisti ki zna ajna negativna korelacija (-0.62, P<0,001) izmeu udjela mlije ne kiseline i broja ukupnih bakterija te izmeu udjela mlije ne kiseline i ukupnog broja kvasaca i plijesni (-0.60, P<0,001). Prema korelacijama, ato je vei udio mlije ne kiseline u ukupnim kiselinama u sila~i, manje je prisutnih bakterija, kvasaca i plijesni. Ova povezanost u skladu je s djelovanjem mlije ne kiseline  njenom brzom proizvodnjom opada i pH koji inhibira rast nepo~eljnih mikroorganizama (Kung, 2001). Prema istome autoru, kontinuiranom proizvodnjom mlije ne kiseline smanjuje se i rast svih bakterija, uklju ujui i same bakterije mlije ne kiseline. Dobiveni rezultati fermentacijske i mikrobioloake analize uzoraka kukuruzne sila~e sa domainstava u Koprivni ko-kri~eva koj ~upaniji pokazali su da je veina sila~a zadovoljila kriterije kvalitetnog siliranja. Sa~etak Kukuruzna sila~a danas predstavlja najva~niju sila~nu kulturu u Republici Hrvatskoj i diljem svijeta, a kontrola njene kvalitete va~an je dio hranidbenog programa mlije nih farmi. Cilj ovog istra~ivanja bio je utvrditi fermentacijske i mikrobioloake karakteristike kvalitete sila~a sa obiteljskih poljoprivrednih gospodarstava iz podru ja Koprivni ko-kri~eva ke ~upanije. Po etkom 2012. godine sakupljen je 31 uzorak kukuruzne sila~e, proizvedene u razli itim uvjetima. Odreena je pH vrijednost i omjer fermentacijskih kiselina prema Fliege-u, a od mikrobioloakih pokazatelja kvalitete fermentacije odreene su ukupne bakterije, kvasci i plijesni. Izmjerene pH vrijednosti kretale su se u rasponu od 3,74 do 7,11, od ega je veina uzoraka imala pH ni~i od grani nog (pH 4,2), pokazujui da je sila~a bila uglavnom dobro silirana prema ovom pokazatelju kvalitete siliranja. U 35% uzoraka sila~a odreen je optimalan odnos mlije ne i octene kiseline s omjerom veim od 3:1. Ujedno, 32% uzoraka imalo je broj kvasaca manji od 105 CFU/g (log10 5 CFU/g), a u 68% uzoraka plijesni nisu odreene. Dobiveni rezultati fermentacijske i mikrobioloake analize uzoraka kukuruzne sila~e pokazali su da, unato  varijabilnosti, veina zadovoljava kriterije kvalitetnog siliranja. LITERATURA 1. BALZER, I. (1961): Analiti ke metode odreivanja kvalitete sila~e. Krmiva 2, 41-44. 2. FILYA, I. (2003): The effect of Lactobacillus buchneri, with or without homofermentative lactic acid bacteria, on the fermentation, aerobic stability, and ruminal degradability of wheat, sorghum, and maize silages. J. Appl. Microbiol., 95, 1080 1086. 3. FULGUEIRA, C.L., AMIGOT, S.L., GAGGIOTTI, M., ROMERO, L.A. AND BASLICO, J.C. (2007): Forage quality: techniques for testing. Fresh Produce. 1(2), 121 131. 4. GOTLIEB, A. R. (2002): Mycotoxins in silage: a silent loss in profits. http//www.insurance-portal.com/051502fcsmold.pdf 5. HRN EN ISO 4833 (2003): Horizontalna metoda za brojanje mikroorganizama - Postupak brojanja pri 30 C, Hrvatski zavod za norme, Zagreb, Hrvatska 6. ISO 21527-2 (2008): Postupak brojanja kolonija kvasaca i plijesni u proizvodima koji imaju aktivnost vode manju ili jednaku 0,95 7. ISO 6497 (2002): Animal feeding stuffs sampling. 8. ISO 6498 (1998): Animal feeding stuffs -- Preparation of test samples 9. KUNG, L. (2001): Silage fermentation and additives. In. Science and Technology in the Feed Industry. Proc. Alltech s Seventeenth Annual Symp. (Lyons T.P. and Jacques K.A., eds.) Nottingham University Press, 145-159. 10. KUNG, L. AND SHAVER, R. D. (2001): Interpretation and use of silage fermentation analysis reports. Focus on Forage 3(13), 1-5. University of Wisconsin. http://www.uwex.edu/ces/crops/uwforage/Fermentation.pdf 11. KUNG, L. AND STOKES, M. R. (2001): Analyzing silages for fermentation end products. http://ag.udel.edu/anfs/faculty/kung/articles/analyzing_silages_for_fermentati.htm 12. MEESKE, R. (2005): Silage additives: Do they make a difference? S.A.-Anim. Sci. 6 (1), 49-55. 13. NKOSI, B.D., MESKE, R., PALIC, D., LANGA, T., LEEUW, K.-J. AND GROENEWALD, I.B. (2009): Effects of ensiling whole crop maize with bacterial inoculants on the fermentation, aerobic stability, and growth performance of lambs. Anim. Feed Sci. Technol., 154, 193 203. 14. REIS, R. A., ALMEIDA, E. O., SIQUEIRA G. R., BERNARDES, T. F., JANUSCKIEWICZ, E. R. AND ROTH, M. T. P. (2005): Microbial changes and aerobic stability in high moisture maize silages inoculated with Lactobacillus buchneri. Proc. of the 14th International Silage Conference a satellite workshop of the 20th International Grassland Congress (Park R. S. and Stronge M. D., eds.)Wageningen Academic Publishers, 223. 15. SEGLAR, B. (2003): Fermentation Analysis and Silage Quality Testing. Proc. Minnesota Dairy Health Conference, College of Veterinary Medicine, University of Minnesota http://www.cvm.umn.edu/dairy/prod/groups/cvm/@pub/@cvm/documents/asset/cvm_22260.pdf 16. STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM (SAS; 2003): OnlineDoc Software Release 9.1., SAS Institute Inc., Cary, NC, USA 17. TAYSOM, D. (2002): U.S. Dairy Forage Research Center: Managing Forage Resources.  HYPERLINK "http://www.ars.usda.gov/Research/docs.htm?docid=11065" http://www.ars.usda.gov/Research/docs.htm?docid=11065 The quality of corn silage from family farm in the Koprivni ko  kri~eva ka borough during 2012 Manuela ZADRAVEC, DVM; Jelka PLEADIN, BSc, PhD, Assistant Professor, Scientific Advisor, Mario MITAK, PhD, Scientific Advisor, Croatian Veterinary Institute, Zagreb; Marija DUVNJAK, BSc., Kristina KLJAK, BSc., PhD, Faculti of Agriculture, Zagreb,; Vesna JAKI TKALEC, DVM, Darko MAJNARI, PhD,Scientific Associate, Kri~evci Veterinary Institute. Corn silage today represents the most important silage culture in Croatia and around the world, therefore its quality control is an important part of the food programs of dairy farm. The aim of this study was to determine the characteristics of microbial fermentation and quality silage from family farms in the area of Koprivni ko- kri~eva ka borough. Thirty one (31) samples of corn silage produced in different conditions, were collected in early 2012, and were determined by their pH value and the ratio of acid fermentation by Fliege-in. The microbiological quality indicators were determined according to fermentation bacteria, yeasts and molds. The measured pH values were in the range from 3.74 to 7.11, from which the majority of the samples had a pH lower than the limit (pH 4.2), demonstrating that the silage was generally good on this indicator ensiled silage quality. Thirty five percent (35%) of silage samples was determined by an optimal ratio of lactic and acetic acid with a ratio greater than 3:1. Also, 32% of the samples had a number of yeasts less than 105 CFU / g (5 log10 CFU / g), and 68% were not certainly not molds. The obtained results of the fermentation and microbiological analysis of the samples of corn silage showed that, despite the variability, most meet the criteria of good silage production. FFFFFF2H4HrHHHIII.I2IIIIJ J8J:J@JBJXJ\JtJJJJJJJJKK&K*KKKLLLL8MJMNĵĵĵ}hECJOJQJaJhxYhM9CJH*OJQJaJhxYhM9CJH*OJQJaJh@6CJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJhM9CJOJQJaJhhM9CJH*OJQJaJhhM9CJOJQJaJhhM9CJH*OJQJaJ/NNNNNPP$P&P.P2PjPnPPPPPPFUHUtUxUzUUUUU"V4VpVXXVZ;sgg[h{ CJOJQJaJhCJOJQJaJh@6CJOJQJaJh hNICJH*OJQJaJh hM9CJH*OJQJaJh hM9CJH*OJQJaJh hNICJOJQJaJh hM9CJOJQJaJh(/CJOJQJaJhM9CJOJQJaJhxYhM9CJOJQJaJhm'CJOJQJaJ PPP@P|PP$d$Ifa$gd@6^`gdNIPPPPPPI8888$d$Ifa$gdNIkd @$$Ifl\Tl x"M2A   t0O#644 lap(PPQ QQQI8888$d$Ifa$gdNIkdA$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(QQ"Q.Q:Q>QI8888$d$Ifa$gdNIkdB$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(>Q@QDQRQ^QbQI8888$d$Ifa$gdNIkdB$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(bQdQhQvQQQI8888$d$Ifa$gdNIkdC$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(QQQQQQI8888$d$Ifa$gdNIkdD$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(QQQQQQI8888$d$Ifa$gdNIkdE$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(QQQQQQI8888$d$Ifa$gdNIkdF$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(QQQRRRI8888$d$Ifa$gdNIkdG$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(RRR(R4R8RI8888$d$Ifa$gdNIkdH$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(8R:R@RLRZR^RI8888$d$Ifa$gdNIkdxI$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(^R`RfRrR~RRI8888$d$Ifa$gdNIkdgJ$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(RRRRRRI8888$d$Ifa$gdNIkdVK$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(RRRRRRI8888$d$Ifa$gdNIkdEL$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(RRRRRRI8888$d$Ifa$gdNIkd4M$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(RRRSSSI8888$d$Ifa$gdNIkd#N$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(SS S,S8SSDSPS\S`SI8888$d$Ifa$gdNIkdP$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(`SbShStSSSI8888$d$Ifa$gdNIkdP$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(SSSSSSI8888$d$Ifa$gdNIkdQ$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(SSSSSSI8888$d$Ifa$gdNIkdR$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(SSSSSSI8888$d$Ifa$gdNIkdS$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(SSSTTTI8888$d$Ifa$gdNIkdT$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(TTT(T4T8TI8888$d$Ifa$gdNIkdU$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(8T:T@TLTXT`TI8888$d$Ifa$gdNIkdV$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(`TbThTtTTTI8888$d$Ifa$gdNIkdyW$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(TTTTTTI8888$d$Ifa$gdNIkdhX$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(TTTTTTI8888$d$Ifa$gdNIkdWY$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(TTTTTTI8888$d$Ifa$gdNIkdFZ$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(TTUUU UI8888$d$Ifa$gdNIkd5[$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap( U"U(U4U@UDUI8888$d$Ifa$gdNIkd$\$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(DUFUUU[IB11$dh`a$gdNIgdNIkd]$$Ifl\Tl x"M2A  t0O#644 lap(VZpZ\[[\6\D]F]H]X]`ebexe|e>gBgZgl6m}}}J~N~vg[gKvȈʈ  DFHNRVXdftv‰։؉ "$,.6`jlʊ̊ҊԊ֊؊۶ƤƤ"h}0JCJOJQJaJmH sH h}CJOJQJaJmH sH (hh;0JCJOJQJaJmH sH $hh;CJOJQJaJmH sH "h+0JCJOJQJaJmH sH @&(,2DFd|~Ƌڋ܋ &<JlntƧhh(=CJOJQJaJh}CJOJQJaJmH sH "h}0JCJOJQJaJmH sH (hh;0JCJOJQJaJmH sH $hh;CJOJQJaJmH sH 501h:pP=. A!"#$% $$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh505n55 #v0#vn#v#v :V l t0u,,505n55 ap($$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2 $$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh5X5T5T5T5#vX#vT#v:V l t 6`0 ,,5X5T5p2$$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#65M525A 5 / / p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p($$If!vh555 5k #v#v#v #vk :V l t0O#6,5M525A 5 p(j# 666666666vvvvvvvvv66666>6666666666666666666666666666666666666666666666666hH6666666666666666666666666666666666666666666666666666666666666666662 0@P`p2( 0@P`p 0@P`p 0@P`p 0@P`p 0@P`p 0@P`p8XV~ OJPJQJ_HmHnHsHtHJ`J  Normal dCJ_HaJmHsHtH DA`D Default Paragraph FontRi@R 0 Table Normal4 l4a (k ( 0No List .( . 90 Line NumberB' B @0Comment ReferenceCJaJD D @0 Comment TextCJaJmHsH>/!> @0Comment Text ChartH @j @ @0Comment Subject5\J/AJ @0Comment Subject Char 5\tH V RV @0 Balloon Text dCJOJQJaJmHsHR/aR @0Balloon Text CharCJOJQJ^JaJtH  M9 Table Grid17:V0CJOJPJQJ^JaJtH jj M9 Table Grid7:V0 M9 Table Grid117:V0CJOJPJQJ^JaJtH  M9 Table Grid27:V0CJOJPJQJ^JaJtH  M9 Table Grid127:V0CJOJPJQJ^JaJtH    Table Grid137:V0CJOJPJQJ^JaJtH 6U@6 (=0 Hyperlink >*B*phFVF (=0FollowedHyperlink >*B*phO ;hpsO ;atnV @V "Footer! p#dCJOJPJQJaJtHB!B ! Footer CharCJOJPJQJaJPK![Content_Types].xmlj0Eжr(΢Iw},-j4 wP-t#bΙ{UTU^hd}㨫)*1P' ^W0)T9<l#$yi};~@(Hu* Dנz/0ǰ $ X3aZ,D0j~3߶b~i>3\`?/[G\!-Rk.sԻ..a濭?PK!֧6 _rels/.relsj0 }Q%v/C/}(h"O = C?hv=Ʌ%[xp{۵_Pѣ<1H0ORBdJE4b$q_6LR7`0̞O,En7Lib/SeеPK!kytheme/theme/themeManager.xml M @}w7c(EbˮCAǠҟ7՛K Y, e.|,H,lxɴIsQ}#Ր ֵ+!,^$j=GW)E+& 8PK!Ptheme/theme/theme1.xmlYOo6w toc'vuر-MniP@I}úama[إ4:lЯGRX^6؊>$ !)O^rC$y@/yH*񄴽)޵߻UDb`}"qۋJחX^)I`nEp)liV[]1M<OP6r=zgbIguSebORD۫qu gZo~ٺlAplxpT0+[}`jzAV2Fi@qv֬5\|ʜ̭NleXdsjcs7f W+Ն7`g ȘJj|h(KD- dXiJ؇(x$( :;˹! I_TS 1?E??ZBΪmU/?~xY'y5g&΋/ɋ>GMGeD3Vq%'#q$8K)fw9:ĵ x}rxwr:\TZaG*y8IjbRc|XŻǿI u3KGnD1NIBs RuK>V.EL+M2#'fi ~V vl{u8zH *:(W☕ ~JTe\O*tHGHY}KNP*ݾ˦TѼ9/#A7qZ$*c?qUnwN%Oi4 =3ڗP 1Pm \\9Mؓ2aD];Yt\[x]}Wr|]g- eW )6-rCSj id DЇAΜIqbJ#x꺃 6k#ASh&ʌt(Q%p%m&]caSl=X\P1Mh9MVdDAaVB[݈fJíP|8 քAV^f Hn- "d>znNJ ة>b&2vKyϼD:,AGm\nziÙ.uχYC6OMf3or$5NHT[XF64T,ќM0E)`#5XY`פ;%1U٥m;R>QD DcpU'&LE/pm%]8firS4d 7y\`JnίI R3U~7+׸#m qBiDi*L69mY&iHE=(K&N!V.KeLDĕ{D vEꦚdeNƟe(MN9ߜR6&3(a/DUz<{ˊYȳV)9Z[4^n5!J?Q3eBoCM m<.vpIYfZY_p[=al-Y}Nc͙ŋ4vfavl'SA8|*u{-ߟ0%M07%<ҍPK! ѐ'theme/theme/_rels/themeManager.xml.relsM 0wooӺ&݈Э5 6?$Q ,.aic21h:qm@RN;d`o7gK(M&$R(.1r'JЊT8V"AȻHu}|$b{P8g/]QAsم(#L[PK-![Content_Types].xmlPK-!֧6 +_rels/.relsPK-!kytheme/theme/themeManager.xmlPK-!Ptheme/theme/theme1.xmlPK-! ѐ' theme/theme/_rels/themeManager.xml.relsPK] T $ t D&8?DKSZFNVZN~@/1234679G[ f;DD&D8DJD\DnDDDDDDDDEE)EUvUzUPPPQ>QbQQQQQR8R^RRRRRS?@ABCDEFHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ\]^_`abcdefghijklmnopqrstuvwxyz{|}~LL*MTX8@0(  B S  ? _Hlt347301883 _Hlt347301884&M&M!T@@'M'M!T%&:< 46t| (0AJjo    ) . 0 < E O ^ j } ~   " P Zwx  "%/;=>JK#!#12=@"/178 +,_a$%/ !N"]"e"r"y"""""0#3###$$$$$$?%@%Q%R%Z%())))+*-***************++w+y+, ,*,,,3,>,J,L,,,,,,,,, -`-y-{---....//'0)04060p0q000000222222333337484i4j4r4t45 5&5(5/5155555555q<y<z<{<<<<<<-=3=E=I=U=d=r=t={==========+>->8>;>O>Y>{>>>>>>? ???)?,?W?_?{?~??????????@@@/@2@F@H@P@T@[@b@i@r@{@@@@@@@@@@lALL.MnMoMzMMMMMMMMMMMM NN,N-N3N5NCNENFNKN\NaNtN~NNNNNNNN)P4P6P@PPQ!T{}rt I J P S e g w y !#>@[]  !"%'-.3479?@EFIKQRWX[]cdijmouv{|  $%(*,-1278;=?@CDHILNPQUV[\_acdhinortvw{|          ! % & + , / 1 3 4 8 9 = > A D $$$$$%%%(%)%>%@%P%R%Y%Z%_%`%d%e%j%l%s%t%y%z%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% & &&&&&&&(&/&0&5&6&B&D&F&G&L&M&R&S&Z&\&^&_&d&e&j&k&o&p&z&|&~&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&' '''''''')'+'-'.'3'4'9':'A'C'E'F'K'L'Q'R'^'`'b'c'h'i'n'o'{'}''''''''''''''''''''''''''''''''''''''( (((((((()(+(-(.(3(4(9(:(F(H(J(K(P(Q(V(W(c(e(g(h(m(n(s(t(((((((((((((((((((//33/515555555 6 686:6A6B6G6H6J6K6R6S6X6Y6[6\6c6d6i6j6l6m6u6v6{6|6~6666666666666666666666666666666666666666666666666777 7 777777777 7!7#7$7*7+7071747678797>7?7D7E7G7H7J7K7P7Q7V7W7Y7Z7\7]7b7c7h7i7k7l7n7o7t7u7z7{7}7~7777777777777777777777777777777777777777777777777777777778888 8 8888888 8!8$8&8(8)8.8/8485888:8<8=8B8C8H8I8K8L8N8O8T8U8Z8[8]8^8`8a8f8g8l8m8o8p888;;o<q<x<z<lAnAxAzAAABBmCnCCC|D}DEE5E6E~EEYFZFFF.G/GGG?H@HKILIJJKKKKZL[LLL+M.MMMNBOHO!T3((22L+M,M-MMMPPPPQQ Q Q@QMQQQRR-R1R[RoRpRqRtRvRUSWSXS\S`SaSfSfSpSSSSTT!T((22L+M,M-MMMPPPPQQ Q Q@QMQQQRR-R1R[RoRpRqRtRvRUSWSXS\S`SaSfSfSpSSSSTT!TEi--ZjQP 6: ` 4 6 Y p Ts;:g OB?6"bM$i'm'&.( 7.c.O/n/i2@6-'7M9P=[=4[?M@x@~BC5DNIE,J|_KS%_cc_:`t`~Fc.dleEg4UnknownG* Times New Roman5Symbol3. * Arial7.{ @Calibri5. *aTahomaA BCambria Math"q'#GK G * G *#n24SSKqHX $P92!xxMarija DuvnjakManuelaOh+'0\   $ 0<DLTMarija DuvnjakNormalManuela4Microsoft Office Word@5z @Zkr#@X a  G՜.+,D՜.+,, hp|  HP*S  Title 8@ _PID_HLINKSAX6http://www.ars.usda.gov/Research/docs.htm?docid=11065  !"#$%&'()*+,-./0123456789:;<=>?@ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ[\]^_`abcdefghijklmnopqrstuvwxyz{|}~      !"$%&'()*+,-./0123456789:;<=>?@ABCDEFHIJKLMNPQRSTUV[\_Root Entry F0b a^Data ^1Table#FWordDocument 7SummaryInformation(GDocumentSummaryInformation8OMsoDataStorepb aPKb aNFFJLOFVORF==2pb aPKb aItem  PropertiesUCompObj y   F'Microsoft Office Word 97-2003 Document MSWordDocWord.Document.89q