Naslov
Analitički aspekt odabranih ß2-adrenergičkih agonista u tkivu jetre I genotoksikološki učinci na biološkim test sustavima
(Analytical aspect of selected ß2-adrenergic agonists in liver tissue and genotoxicity effects on biological test systems)

Autori
Vulić, Ana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
21.12

Godina
2011

Stranica
125

Mentor
Durgo, Ksenija ; Pleadin, Jelka

Ključne riječi
ostaci klenbuterola i salbutamola; genotoksikološki učinci ß2-adrenergičkih agonista; biološki test sustavi
(clenbuterol and salbutamol residues; genotoxicity of ß2-adrenergic agonists; biological test systems)

Sažetak
SS2-adrenergički agonisti su sintetički spojevi koji tijekom tova životinja mogu, a ovisno o vrsti, starosti i spolu životinje te primijenjenoj dozi i trajanju tretmana, dovesti do značajnog povećanja mase životinje. Zbog njihovog djelovanja na sintezu proteina, proces lipolize, a posljedično i povećanja mase životinja, ß2 adrenegički agonisti počeli su se ilegalno koristiti u proizvodnji mesa kao tvari sa anaboličkim učinkom. Međutim, uporaba ovih tvari u anaboličke svrhe rezultira kumulacijom farmakološki aktivnih ostataka u tkivima tretiranih životinja te su zabilježeni brojni slučajevi akutnih intoksikacija kod ljudi, uglavnom nakon konzumacije jetre tretiranih životinja. Kako uporaba klenbuterola i salbutamola u anaboličke svrhe predstavlja rizik za zdravlje ljudi od velike je važnosti nadzor zlouporabe uz primjenu suvremenih analitičkih metoda kao i toksikološka istraživanja u svrhu procjene mogućih genotoksičnih učinaka navedenih spojeva. U ovom radu razvijena je i validirana sofisticirana analitička metoda (LC-MS/MS) za određivanje koncentracije ß2-agonista u tkivu jetre te su primjenom te metode određene koncentracije klenbuterola i salbutamola u jetri dva soja miševa nakon subkroničnog tretmana navedenim spojevima. Provedbom Ames testa, komet testa, određivanjem citotoksičnosti i prooksidativnog djelovanja te testa kromosomskih aberacija ispitan je genotoksikološki učinak klenbuterola, njegovog metabolita 4-amino-3, 5-diklorobenzojeve kiseline (4-ADBA) te salbutamola. Raspon koncentracija koji je primijenjen za genotoksikološka istraživanja kretao se od 0, 8 ng/mL (terapeutska doza klenbuterola kod primjene kao tokolitika u goveda i konja iznosi 0, 8 ng/g) do 2500 ng/mL (No observed adverse effect level - NOAEL vrijednost). Koncentracija klenbuterola određena u tkivu jetre C57BL/6 miševa (n=40) 30. dan nakon završetka tretmana iznosila je 0, 23 ng/g, a u tkivu jetre BALB/C miševa (n=40) 0, 21 ng/g. Za razliku od klenbuterola, ostaci salbutamola detektirani su u jetri oba soja miševa u vremenskom razdoblju od 15 dana nakon završetka tretmana. Koncentracija salbutamola u tkivu jetre BALB/C miševa (n=40) iznosila je 1, 71 ng/g, a u tkivu jetre C57/BL/6 miševa 4, 60 ng/g. Dobiveni podaci govore da klenbuterol kumulira u tkivu jetre oba soja miševa u duljem vremenskom razdoblju u odnosu na salbutamol. Genotoksikološkim ispitivanjima određeno je da istraživani spojevi ne djeluju citotoksično. Mutageni učinak određen je samo za klenbuterol u koncentraciji na razini NOAEL vrijednosti od 2500 ng/mL bez dodatka metaboličkog aktivatora, kao i prooksidativno djelovanje nakon tretmana stanica adenokarcinoma debelog crijeva u trajanju od 72 sata. Provedbom komet testa te analizom izmjerenih vrijednosti intenziteta repa kometa, utvrđeno je da klenbuterol u koncentracijama od 25, 250 i 2500 ng/mL izaziva povećanje vrijednosti intenziteta repa kometa odnosno oštećenje genetičkog materijala u vidu primarnih oštećenja genomske DNA. Metabolit klenbuterola, 4-ADBA, uzrokuje primarna oštećenja genomske DNA u cijelom koncentracijskom rasponu od 0, 8 ng/mL do 2500 ng/mL. Najveće povećanje intenziteta repa kometa određeno je pri tretmanu sa najvišom koncentracijom 4-ADBA. Salbutamol se također pokazao genotoksičnim uz najveće povećanje vrijednosti intenziteta repa kometa prilikom tretmana sa koncentracijom od 250 ng/mL. Analizom kromosomskih aberacija (CA) utvrđena je ovisnost učestalosti CA i koncentracije klenbuterola i salbutamola korištenih za tretman limfocita za razliku od ovisnosti koncentracije 4-ADBA i učestalosti CA koja nije utvrđena.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija, Prehrambena tehnologija

POVEZANOST RADA