Naslov
Pojavnost bakterija roda Campylobacter spp. u jatu tovnih pilića
(Prevalence of Campylobacter spp. in a small broiler flock)

Autori
Horvatek, Danijela ; Prukner-Radovčić, Estella

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Zbornik sažetaka / - Zagreb : Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, 2007

Skup
Veterinarska znanost i struka

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 26.10.2007

Vrsta sudjelovanja
Predavanje

Vrsta recenzije
Nije recenziran

Ključne riječi
Campylobacter; tovni pilići; PCR
(Campylobacter; broiler flock; PCR)

Sažetak
Kampilobakterioza je druga po redu najučestalija zoonoza - toksoinfekcija koja se prenosi hranom u Republici Hrvatskoj, a posebno je česta u djece. U razvijenim zemljama svijeta, posebno zemljama Europske unije, zauzima prvo mjesto. Najveću opasnost za zdravlje ljudi predstavlja kontaminirano meso peradi. Najznačajnije vrste koje uzrokuju bolest su termofilni C. jejuni, C. coli i C. lari. U ljudi oboljelih od kampilobakterioze oko 90% izdvojenih sojeva pripada C. jejuni, koji se u najvećem postotku izdvaja iz peradi, dok su preostali uglavnom identificirani kao C. coli, koji je predominant u svinja, ali ga se može izdvojiti i iz peradi i drugih životinja. Da bi se odredila pojavnost Campylobacter spp. već na farmi, nasumično su uzeti obrisci kloake 31 tovnog pileta dobi 10 tjedana, na malom obiteljskom gospodarstvu u blizini Zagreba. Pilići su držani slobodno («free-range») u malom jatu od 100 jedinki. Obrisci u laboratoriju nacijepljeni su u selektivni tekući bujon (Campylobacter Selective Enrichment Broth - Oxoid)) i inkubirani na 42ºC kroz 48 sati u mikroaerofilnim uvjetima (85%N2, 10% CO2, 5 % O2). Nakon obogaćivanja rasta, bujon je nasađen na selektivnu modificiranu čvrstu podlogu (modified charcoal cefoperazone desoxycholate agar (mCCDA) (Oxoid)), te ponovno inkubiran kroz 48 sati na 42ºC, u mikroaerofilnim uvjetima. Kolonije karakterističnog makroskopskog i mikroskopskog izgleda na temelju Gram-negativnog bojenja, te pozitivnih katalaza i oksidaza reakcija identificirane su kao Campylobacter spp. Ukupna DNK koja se dalje koristila u postupku multiplex lančane reakcije polimerazom izolirana je iz 48-satne kulture bakterija pripremljene u neutralnom bujonu br. 2, postupkom prema Jacksonu i sur. (1993). Identifikacija sojeva uslijedila je postupkom prema Manfredi i sur. (2003). Očekivani PCR produkti bili su veličine 857, 589 i 462 parova baza, što odgovara rodu Campylobacter i vrstama C. jejuni, odnosno C. coli. Iz svih uzetih obrisaka (ukupno 31) izdvojena je bakterija Campylobacter spp. Sojevi su podvrgnuti daljnjoj identifikaciji pomoću mPCR, te je 16 sojeva identificirano kao C. coli, 9 kao C. jejuni, dok je za šest sojeva identifikacija u tijeku. Standardne mikrobiološke i biokemijske dijagnostičke metode, koje se najčešće rutinski koriste u laboratorijima, nisu dovoljno pouzdane u utvrđivanju razlika ili sličnosti izdvojenih sojeva Campylobacter spp. Ta se ograničenja mogu premostiti upotrebom novijih, molekularnih metoda, kao što je lančana reakcija polimerazom. Multiplex PCR temelji se na upotrebi više setova početnica u jednoj reakciji, a istovremeno može se obaviti detekcija roda Campylobacter i identifikacija vrsta. Ove jednostavne i brze metode mogu uvelike pridonijeti interpretaciji rezultata epidemioloških istraživanja i praćenju pojedinih genotipova bakterija „od farme do stola“, što će i biti cilj budućih istraživanja.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Javno zdravstvo i zdravstvena zaštita, Veterinarska medicina

POVEZANOST RADA