Naslov
Biotehnologija i besmrtne stanice
(Biotechnology and Immortalized cells)

Autori
Matić, Igor ; Radnić, Maja ; Furčić, Ivana ; Nagy, Biserka

Izvornik
Technologica acta (1840-0426) 2 (2009); 5-12

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Radovi u časopisima, članak, znanstveni

Ključne riječi
stanična kultura ; besmrtnost ; tumor supresor gen p53 ; mutacijski spektar
(Cell cultures ; Immortalization ; tumor suppressor p53 ; mutation spectrum)

Sažetak
Životni vijek animalnih stanica u kulturi u uvjetima in vitro je ograničen i genetički kontroliran. Djelovanjem karcinogena moguće je postići besmrtnost stanica, a sami koraci koji vode do besmrtnosti nisu dovoljno poznati. Tumor supresor gen p53 je uključen u kontrolu staničnog ciklusa i postoje dokazi o njegovoj ulozi u kontroli životnog vijeka ljudskih stanica i stanica glodavaca. Postavili smo pitanje jesu li mutacije u genu p53 uključene u proces spontanog prijelaza mišjih embrionalnih stanica u besmrtnu staničnu. Tri stanične linije mišjih embrionalnih fibroblasta, NIH 3T3 stanice, FADD+/+ stanice divljeg tipa i FADD-/- knockout stanice, dobivene su iz mišjih embrija. Četiri kodona p53 gena umnožena su lančanom reakcijom polimeraze (PCR) korištenjem četiri specifične početnice. Korištenjem uzvodnih početnica specifičnih za određeni tip mutacije i univerzalnih nizvodnih početnica, sljedovi genomske DNA p53 gena ispitani su AS- PCR-om (eng. allele-specific polymerase chain reaction) na prisutnost CC u TT mutacije na kodonima 154-155 i 175-176 eksona 5 te C u T mutacije na kodonima 270 i 275 eksona 8. Produkti AS-PCR reakcije analizirani su gel elektroforezom. Tri stanične linije nisu pokazale prisutnost mutacija na kodonima 154- 155, 175-176 i 275, dok je početnica specifična za mutaciju na kodonu 270 umnožila PCR produkt veličine 134 parova baza u svim ispitivanim staničnim linijama. Možemo zaključiti da se p53 mutacije pojavljuju i pogoduju stanicama koje su postale besmrtne.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA