Naslov
Primjena lančane reakcije polimerazom u dijagnostici klamidofiloze u ptica
(Using the PCR diagnostic method to show the presence of Cp. psittaci in birds)

Autori
Križek, Ivan

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Veterinarski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
29.12

Godina
2008

Stranica
101

Mentor
Prukner-Radovčić, Estella

Ključne riječi
dijagnostika; PCR; Chlamydia; ptice
(diagnostic methods; PCR; Chlamydia; birds)

Sažetak
Chlamydophila psittaci (Cp. psittaci) zaražava brojne vrste divljih ptica i peradi te uzrokuje oboljenje u čovjeka. Dijagnostika klamidofiloze/klamidioze, za razliku od mnogih drugih bakterijskih bolesti, vrlo je složena i opasna po laboratorijsko osoblje. U Republici Hrvatskoj se prevencija i suzbijanje bolesti u ptica prema obavlja prema zakonskoj odredbi, a dijagnostika se vrši u jedinom ovlaštenom laboratoriju koji se nalazi pri Zavodu za bolesti peradi s klinikom, Veterinarskog fakulteta, Sveučilišta u Zagrebu. Tijekom 2007. godine prikupljeno je 1068 uzoraka od različitih vrsta ptica i peradi iz različitih županija Republike Hrvatske. Uzorci su pretraženi različitim dijagnostičkim postupcima, no posebno je razrađen postupak PCR te RealTimePCR. Korištene su metode ELISA, brzi imuno test (Clearview), konvencionalni PCR i RealTimePCR postupak, a pozitivni uzorci su i genotipizirani metodama RFLP-PCR i MLVA. Od ukupno 1068 pretraženih, 178 uzoraka (16, 67 %) je bilo pozitivno na Cp. psittaci. Prema županijama najveći broj zabilježenih pozitivnih uzoraka potječe iz Požeško-slavonske županije (50%). Prema mjestu uzorkovanja uzorci su potjecali iz trgovina kućnim ljubimcima, od uzgajivača, privatnih držaoca kućnih ljubimaca i zooloških vrtova. Najveći broj pozitivnih nalaza (17, 21%) je potjecao od uzgajivača. Dijagnostička metoda PCR poslužila je i za razjašnjavanje nespecifičnih reakcija ELISA probom, te je ustanovljeno da su najčešće nespecifična reakcija kod uzoraka porijeklom od goluba (od 18 ELISA nespecifično pozitivnih uzoraka klamidofila je potvrđena u samo jednom). Uspoređivani su i rezultati metodama PCR i RealTime PCR (27 uzoraka) te su ti podaci poslužili u procjeni pogodnosti skladištenja DNA na -20 oC. Takvim načinom čuvanja, nakon godinu dana, bilo je dovoljno DNA za analizu u svega 7 (29, 63%) uzoraka . Prvi put u Republici Hrvatskoj je izvršena i genotipizacija bakterije Cp. psittaci porijeklom od ptica. Genotipizirano je sedam pozitivnih uzoraka usporedno metodama RFLP-PCR i MLVA. Utvrđeno je da prema genotipu jedan uzorak porijeklom od papige pripada serotipu A, a šest uzoraka porijeklom od goluba serotipu E/B. Prikupljeni su i podaci o oboljelim ljudima od psitakoze u razdoblju od 1997. do 2007. godine te je ustanovljeno da je najviše oboljelih (13 osoba) bilo u 2007. godini. Dijagnostička metoda PCR za dokazivanje prisutnosti bakterije Cp. psittaci te RealTimePCR za dokaz bilo koje vrste bakterija iz porodice Chlamydophila primijenjene u ovom istraživanju dokazale su se kao specifične, osjetljive i primjenjive u rutinskoj dijagnostici klamidofiloze/klamidioze ptica, a genotipizacija odabranih sojeva bakterija postupcima RFLP-PCR i MLVA kao nužna u epidemiološke svrhe. Rezultati ove studije pokazuju da je infekcija bakterijaom Cp. psittaci javno zdravstveni problem te je nužna uspostava boljeg praćenja epidemiološke situacije u Republici Hrvatskoj na državnom nivou, u zajedništvu veterinarskog i javnog zdravstva. Rastući trend povećanja ekološke proizvodnje peradi, prema rezultatima ovog istraživanja, zahtijevat će povećanu kontrolu nad divljim pticama kao potencijalnim prenosiocima različitih vrsta klamidofila.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Veterinarska medicina

POVEZANOST RADA