Naslov
Ciljana mutageneza metil-transferaze NpmA, novog enzima koji uzrokuje kliničku rezistenciju na aminoglikozidne antibiotike
(First insight into catalytic and cofactor binding site of novel aminoglycoside resistance methyltransferase NpmA)

Autori
Babić, Fedora ; Čubrilo, Sonja ; Maravić Vlahoviček, Gordana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Zbornik sažetaka / Zahradka, Ksenija ; Plohl, Miroslav ; Ambriović-Ristov, Andreja - Zagreb : Institut Ruđer Bošković, 2008

ISBN
978-953-6690-78-7

Skup
Znanstveni simpozij 50 godina molekularne biologije u Hrvatskoj

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 20.11.2008. - 21.11.2008

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
aminoglikozidni antibiotici; antimikrobna rezistencija; metilacija rRNA; metil-transferaza NpmA
(aminoglycoside antibiotics; microbial resistance; rRNA methylation; NpmA methyltransferase)

Sažetak
Mehanizam djelovanja nekih antibiotika je inhibicija sinteze proteina vezanjem na funkcijski važna mjesta ribosoma. Bakterije koje proizvode antibiotike kao i sve veći broj kliničkih sojeva posjeduju različite rRNA metil-transferaze koje metilacijom specifičnog nukleotida na rRNA onemogućuju vezanje antibiotika. Sve učestalija rezistencija na aminoglikozidne antibiotike uzrokovana je djelovanjem metil-transferaza iz porodica Arm i Kam. U kliničkim sojevima E. coli rezistentnim na aminoglikozide pronađen je novi enzim NpmA. NpmA je N-1 metil-transferaza iz porodice Kam koja metilira adenin na položaju A1408 unutar A mjesta u maloj podjedinici ribosoma. Svrha našeg rada je funkcijska karakterizacija metil-transferaze NpmA. Gen za metil-transferazu NpmA kloniran je u pET-25b (+) vektor i ciljanom mutagenezom izmijenjena su evolucijski očuvana mjesta. Stanice E. coli inače osjetljive na antibiotike transformirane su rekombinantnim vektorom te je in vivo testom utvrđena minimalna inhibitorna koncentracija za kanamicin i gentamicin. Usporedbom rezultata mutanata i divljeg tipa možemo pretpostaviti gdje se nalaze funkcijski važna mjesta enzima kao i mjesto vezanja kofaktora S-adenozil-metionina. U tijeku su podrobnija kinetička ispitivanja koja će omogućiti razumijevanje mehanizma djelovanja NpmA i stvoriti temelj za pronalazak prikladnog inhibitora koji bi zaustavio ovaj novi tip rezistencije na aminoglikozide.

Izvorni jezik
Engleski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA