аЯрЁБс>ўџ +.ўџџџ,џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0аˆ 4@P dp Œ ˜ ЄАИРШтyPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJANRIM Zoran TadiцoraNormala Zoran Tadiц4raMicrosoft Word 8.0A@М e@ЮЕhЯЁО@”J}иЁОРўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎМx hp”œЄЌ ДМФЬ д YтInstitute of Time WastingR Г  yPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Title˜ 6> _PID_GUIDтANPRIMJENA LAN ANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA V. Lackovi, Z. Tadi, A. Gomer i, A. Vitkovi1, P. Bosni1, I. Baai Zavod za animalnu fiziologiju, PMF, Zagreb, Hrvatska 1Centar za reprodukciju u sto arstvu, Zagreb, Hrvatska Maligna {E0061849-0DD4-11D3-80DC-008048C288F6}Microsoft Office0Templates|ECŽ№рOа ъ:iЂи+00/C:\0Program Files 0Microsoft Office0Templates) <@а{@:UTVRаIVANJE STATUSA GENA ZA MALIGNU HIPERTERMIJU U SVINJA Title˜ 6> _PID_GUIDтAN{E0061842-0DD4-11D3-80DC-008048ђє‚ьZ\l§§§§§§§ђє‚ьZ\lRTjlьюl‚(ћѕћѕћѕћћћ CJH*mHCJmH RTjlьюl‚(†)ћѕћѕћѕћћћћ CJH*mHCJmH oznom gelu te o itavanja rezultata pod UV svjetlom. U istr~ivanjima smo testirali uzorke sa dviju farmi u Hrvatskoj. Rezultati su pokazali prisustvo hipertermija (stres sindrom) je nasljedna metaboli ka bolest u svinja koja se o ituje nakon podvrgavanja svinja stresu (primjerice, neprimjerene brige o ~ivotinjama i loaih uvjeta transporta). Za nastanak bolesti odgovorna je mutacija u genu RYR 1 koji se nalazi na aestom kromosomu (D H Maclennen i sur (1992) Science 256: 789-794). U geneti ki predodreenih jedinki dolazi do poremeaja protoka kalcijevih iona u miainim stanicama, ato dovodi do jakih miainih kontrakcija, poveanog metabolizma, poveanja tjelesne temperature, acidoze i smrzi (J Fuji i sur. (1991) Science 253: 448-451). Meso oboljelih ~ivotinja je blijedo, mekano i vodnjikavo, te kao takvo, ekonomski neiskoristivo. Prvobitno testiranje svinja metodom udisanja plina halotana napuateno je zbog nepouzdanosti rezultata. Geneti ki test pomou lan ane reakcije polimerazom omoguuje jednostavno, brzo i to no otkrivanje nositelja mutiranog gena. Metoda se temelji na umna~anju dijela gena, njegovom cijepanju restrikcijskim enzimom, razdvajanju na agaroznom gelu te o itavanja rezultata pod UV svjetlom. U istr~ivanjima smo testirali uzorke sa dviju farmi u Hrvatskoj. Rezultati su pokazali prisustvo oko 11% heterozigota (N/n) i oko 1% recesivnih homozigota (n/n) i mogu se usporediti s rezultatima testiranja u SAD i Europi (P J O, Brien i sur. (1993) JAVMA 203: no 6, 842-851). Daljnja istra~ivanja bit e usmjerena na mogunosti stvaranja modela selekcije svinja sa ciljem uklanjanja mutiranog gena.ma, poveanja tjelesne temperature, acidoze i smrzi (J Fuji i sur. (1991) Science 253: 448-451). Meso oboljelih ~ivotinja je blijedo, mekano i vodnjikavo, te kao takvo, ekonomski neiskoristivo. hipertermija (stres sindrom) je nasljedna metaboli ka bolest u svinja koja se o ituje nakon podvrgavanja svinja stresu (primjerice, neprimjerene brige o ~ivotinjama i loaih uvjeta transporta). Za nastanak bolesti odgovorna je mutacija u genu RYR 1 koji se nalazi na aestom kromosomu (D H Maclennen i sur (1992) Science 256: 789-794). U geneti ki predodreenih jedinki dolazi do poremeaja protoka kalcijevih iona u miainim stanicama, ato dovodi do jakih miainih kontrakcija, poveanog metabolizma, poveanja tjelesne temperature, acidoze i smrzi (J Fuji i sur. (1991) Science 253: 448-451). Meso oboljelih ~ivotinja je blijedo, mekano i vodnjikavo, te kao takvo, ekonomski neiskoristivo. Prvobitno testiranje svinja metodom udisanja plina halotana napuateno je zbog nepouzdanosti rezultata. Geneti ki test pomou lan ane reakcije polimerazom omoguuje jednostavno, brzo i to no otkrivanje nositelja mutiranog gena. Metoda se temelji na umna~anju dijela gena, njegovom cijepanju restrikcijskim enzimom, razdvajanju na agaroznom gelu te o itavanja rezultata pod UV svjetlom. U istr~ivanjima smo testirali uzorke sa dviju farmi u Hrvatskoj. Rezultati su pokazali prisustvo [$@ёџ$NormalmH <A@ђџЁ<Default Paragraph Fontљџџџџ.ћœ€€˜€€†)llџџ Zoran Tadi!C:\WINDOWS\Desktop\Ana\Zoran2.doc Zoran Tadi/C:\windows\temp\AutoRecovery save of Zoran2.asdџ@€јјД5†ј,X5чЩбјљ@AAТAd#A('A8'@jG‡ŸTimes New Roman5€Symbol3& ‡ŸArial"1ˆаhš5fвš5f Р !ЅРДД€0џџxPRIMJENA LAN ANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJAьЅСG $ПlbjbjŽйŽй ьГьГЪџџџџџџ]’’’’’’Іжжжж т ІЧЖњњњњњњњњ\^^^^^^$}єqF‚E’њњњњњ‚њ’’њњњњњњњ’њ’њ\ІІ’’’’њ\њbњ\’’\њю Go7иЁОІ0жњ\Root EntryŒрEY  0ъE<@МрE&№P Hџџџџџџџџ РF`wзЁОGo7иЁО#€,1Tableё 0ъE<@$сE&№P HсE++(сEџџџџXсE&№P H8сE*+З0ъEWordDocumentсEU 0ъE<@РсE&№џџџџџџџџФсE! 0ъE<@єсE&№'SummaryInformationP HтE&&,тE(џџџџ<@\тE&№P H<тE%%`тE … џџџџџџџџџџџџ)џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџџџџџџџџџџџџџџџ§џџџўџџџўџџџ !ўџџџ$%8џџџџџџџџџџџџ*џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ9"џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџDocumentSummaryInformation<@ФтE8џџџџџџџџџџџџ#ШтE 0ъE<@јтETитECompObjщ 0ъE<@,уE&№P H уE!!џџџџџџџџџџџџ0ъE<@`уE&№P Hj0TableE&№P HtуE˜уEM 0ъE<@џџџџџџџџџџџџЬуEЋP HмуEфEх 0ъE<@0фE&№P HфEџџџџџџџџџџџџБ 0ъE<@dфE&№P HDфEhфEўџџџ ўџџџ ўџџџ !"#$%&'()*ўџџџ,-./0123456789:;<=>?@AўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџAna\Zoran2.docџ@€ЩЩД5†Щ,@5чЩЪ@AAТAd@jG‡ŸTimes New Roman5€Symbol3& ‡ŸArial"1ˆаhš5fаš5fжЦ !ЅРДД€0мџџxPRIMJENA LAN ANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Zoran Tadi Zoran TadiаЯрЁБсаЯрЁБс>ўџ ўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Zoran Tadi Zoran TadiаЯрЁБс [$@ёџ$NormalmH <A@ђџЁ<Default Paragraph FontЪџџџџ.Ьœ€€˜€€(llџџ Zoran Tadi!C:\WINDOWS\Desktop\ўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9ВqаЯрЁБсўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎМx hp”œЄЌ ДМФЬ д YтInstitute of Time WastingR мГ  yPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Title˜ 6> _PID_GUIDтAN{E0061847-0DD4-11D3-80DC-008048C288F6}аЯрЁБс>ўџ ўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0аˆ 4@P dp Œ ˜ ЄАИРШтyPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJANRIM Zoran TadiцoraNormala Zoran Tadiц3raMicrosoft Word 8.0A@0@ЮЕhЯЁО@Ф5иЁОжЦ [$@ёџ$NormalmH <A@ђџЁ<Default Paragraph Fontшџџџџ.ъœ€€˜€€‚llџџ Zoran Tadi Zoran Tadi hp”œЄЌ ДМФЬ д YтInstitute of Time WastingRѓГ  yPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Title˜ 6> _PID_GUIDтANьЅСG 4ПlbjbjŽйŽй *ьГьГљџџџџџџ]’’’’’’Іжжжж т ІWЖњњњњњњњњджжжжжж$ єFњ]’њњњњњњњ’’њњњњњњњ’њ’њдІІ’’’’њдњкњд’’дњю  ˜Ђ€иЁОІ0жњдА‚. АЦA!А"А# $ %А hipertermija (stres sindrom) je nasljedna metaboli ka bolest u svinja koja se o ituje nakon podvrgavanja svinja stresu (primjerice, neprimjerene brige o ~ivotinjama i loaih uvjeta transporta). Za nastanak bolesti odgovorna je mutacija u genu RYR 1 koji se nalazi na aestom kromosomu (D H Maclennen i sur (1992) Science 256: 789-794). U geneti ki predodreenih jedinki dolazi do poremeaja protoka kalcijevih iona u miainim stanicama, ato dovodi do jakih miainih kontrakcija, poveanog metabolizRoot EntryŒрEY  0ъE<@МрE&№P Hџџџџџџџџ РF`wзЁО ˜Ђ€иЁО4@,1Tableё 0ъE<@$сE&№P HсE++(сEџџџџXсE&№P H8сE*+З0ъEWordDocumentсEU 0ъE<@РсE&№џџџџџџџџФсE! 0ъE<@єсE&№'*'SummaryInformationP HтE&&,тE(џџџџ<@\тE&№P H<тE%%`тE … џџџџџџџџџџџџ)џџџџ ўџџџ џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ /џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ(*-§џџџўџџџўџџџўџџџ12350џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџDocumentSummaryInformation<@ФтE8џџџџџџџџџџџџ#ШтE 0ъE<@јтETитECompObjщ 0ъE<@,уE&№P H уE!!џџџџџџџџџџџџ0ъE<@`уE&№P Hj0TableE&№P HtуE˜уEM 0ъE<@џџџџџџџџџџџџЬуEGP HмуEфEх 0ъE<@0фE&№P HфEџџџџџџџџџџџџБ 0ъE<@dфE&№P HDфEhфEўџџџ ўџџџ ўџџџ !"#$%&'()*B,-./0123456789:;<=>?@AўџџџCDўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ HIPERTERMIJE U SVINJA Zoran Tadi Zoran TadiаЯрЁБс MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Zoran Tadi Zoran TadiаЯрЁБс>ўџ +џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџCIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJANRIM Zoran TadiцoraNormala Zoran Tadiц4raMicrosoft Word 8.0A@М e@ЮЕhЯЁО@”J}иЁОР [$@ёџ$NormalmH <A@ђџЁ<Default Paragraph Fontљџџџџ.ћœ€€˜€€†)llџџ Zoran Tadi!C:\WINDOWS\Desktop\Ana\Zoran2.doc Zoran Tadi/C:\windows\temp\AutoRecovery save of Zoran2.asdџ@€јјД5†ј,X5чЩбјљ@AAТAd#A('A8'@jG‡ŸTimes New Roman5€Symbol3& ‡ŸArial"1ˆаhš5fвš5f Р !ЅРДД€0џџxPRIMJENA LAN ANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK [$@ёџ$NormalmH <A@ђџЁ<Default Paragraph FontЪџџџџ.Ьœ€€˜€€(llџџ Zoran Tadi!C:\WINDOWS\Desktop\ўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9ВqаЯрЁБсўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎМx hp”œЄЌ ДМФЬ д YтInstitute of Time WastingR Г  yPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTACIJA U GENU ODGOVORNOM ZA NASTANAK MALIGNE HIPERTERMIJE U SVINJA Title˜ 6> _PID_GUIDтAN{E0061849-0DD4-11D3-80DC-008048C288F6}аЯрЁБс>ўџ ўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0аˆ 4@P dp Œ ˜ ЄАИРШтyPRIMJENA LANШANE REAKCIJE POLIMERAZOM U UTVRаIVANJU MUTA