Naslov
Analiza izvankromosomske DNA ljudskih stanica MDA-MB-231 u kulturi
(Analysis of extrachromosomal DNA of human MDA-MB-231 cells in culture)

Autori
Šegota, Ivo

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički

Mjesto
Zagreb

Datum
28.06

Godina
2006

Stranica
48

Mentor
Rubelj, Ivica

Ključne riječi
nestabilnost genoma; izvankromosomska DNA; telomere; tumorske stanice
(genome instability; extrachromosomal DNA; telomeres; tumor cells)

Sažetak
U zadnjih nekoliko desetljeća značajno se promijenio pogled na strukturu i funkciju genoma normalnih stanica. Danas se zna da je dugo uvriježeno mišljenje da je eukaritski genom relativno stabilan i konstantan krivo i da je genom zapravo fleksibilan i plastičan. S druge strane, genomska nestabilnost je fenomen koji uključuje translokacije, aneuploidiju, rekombinacije, delecije, amplifikacije gena itd., te predstavlja glavno obilježje tumorskih stanica, dok se rijetko može uočiti u normalnim stanicama. Telomere, nukleoproteinski kompleksi na krajevima eukariotskih kromososma, spriječavaju kromosomske aberacije te stoga imaju iznimno važnu ulogu u održavanju stabilnosti genoma. Izvankromososmska DNA jedan je od fenomena koju vežemo uz genomsku nestabilnost. Te male molekule DNA imaju kromososmsko podrijetlo i prisutne su u svim dosad istraživanim eukariotskim stanicama. Tumorske stanice pokazuju povečanu količina izvankromosomske DNA.Telomere stanica MDA-MB-231 analizirao sam pomoću tehnike PNA-FISH. Kromosomi su pokazivali nekoliko obilježja genomske nestabilnosti: poliploidiju, heterogeno obilježavanje telomera i prisutstvo odlomljenih dijelova kromososma. Izvankromosomsku DNA izolirao sam iz intaktnih stanica MDA-MB-231 pomoću alkalne elektroforeze u agaroznom gelu i elektroelucije. . Nakon pročišćavanja, izvankromosomsku DNA analizirao sam agaroznom gel-elektroforezom i elekrtronskom mikroskopijom.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA