Naslov
Ekspresija gena u endometriju žene u razdoblju implantacije s osvrtom na Wnt signalni put
(Global gene profiling in human endometrium during the window of implantation with emphasis on the Wnt signaling pathway)

Autori
Tulač, Suzana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
14.06

Godina
2005

Stranica
144

Mentor
Suchanek, Ernest

Ključne riječi
endometrij; endometrioza; stromalne stanice endometrija; Wnt signalni put; progesteron; Dkk-1
(endometrium; endometrial stromal cells; Wnt signaling pathway; progesterone; Dkk-1)

Sažetak
Ovim istraživanjem dobiven je uvid u ekspresiju gena u razdoblju implantacije u usporedbi s proliferacijskom fazom menstruacijskog ciklusa, upotrebom oligonukleotidne bio-čip tehnologije. Od ukupno 12686 testiranih gena čovjeka, 156 gena dokazano je pojačano eksprimirano, dok je 377 gena smanjeno eksprimirano u razdoblju implantacije. Geni i genske obitelji čija je regulacija značajna u razdoblju implantacije spadaju u grupu sekrecijskih proteina, transkripcijskih čimbenika, ionskih kanala važnih za transport vode, signalnih molekula i imunih modulatora. Dobiveni geni i genske obitelji različito eksprimirani u različitim fazama menstruacijskog ciklusa ukazuju na njihovu važnost za implantaciju, te se mogu smatrati potencijalnim biljezima implantacije. Istraživanje daje i uvid u ekspresiju gena u endometriju pacijentica s endometriozom u usporedbi sa zdravim endometrijem u razdoblju implantacije. Od ukupno 12686 testiranih gena čovjeka, 91 gen je pojačano eksprimiran, dok je 115 gena smanjeno eksprimirano u endometriju pacijentica s endometriozom. Geni čija je ekspresija narušena u endometriju s endometriozom spadaju u gene odgovorne za prihvat endometrija tijekom implantacije, imune funkcije, apoptozu. Neki od reguliranih gena uzrokuju nepovoljnu sredinu u maternici za implantaciju (aromataze, progesteronski receptori, angiogeni čimbenici i drugi). Ovo istraživanje daje uvid u neotkrivene mehanizme narušene implantacije u žena s endometriozom i razloge neplodnosti. Otkriveni su potencijalni biljezi endometrioze, čime je dan doprinos dijagnosticiranju i liječenju navedene bolesti. Dokazana je ekspresija članova Wnt signalnog puta u normalnom endometriju žene iz grupe liganada (Wnt-2, Wnt-3, Wnt-4, Wnt-5a, Wnt-7a, Wnt-8b), receptora (Fz-6, LRP-6), inhibitora (frpHE i Dkk-1) i modulatora (GSK3β i β -katenin). Statistički značajna razlika u ekspresiji liganada (osim Wnt-3), receptora i modulatora u menstruacijskom ciklusa nije primijećena. Wnt-7a je eksprimiran isključivo u luminalnom epitelu, dok su Fz-6 i β -katenin eksprimirani u stromi i žlijezdama endometrija. Njihova regulacija u toku menstruacijskog ciklusa nije primijećena. Istraživani inhibitori su značajno regulirani tijekom ciklusa. FrpHE je eksprimiran isključivo u stromi endometrija s dominantnom ekspresijom u proliferacijskoj fazi ciklusa. To ukazuje na njegovu potencijalnu regulaciju estrogenima. Dkk-1 je pojačano eksprimiran u sekrecijskoj fazi menstruacijskog ciklusa, što upućuje na regulaciju progesteronom. Ekspresija pripadnika Wnt signalnog puta u različitim stanicama endometrija i regulacija inhibitora u različitim fazama ciklusa ukazuje na značajnu ulogu Wnt signalnog puta u razvoju endometrija, njegove proliferacije i diferencijacije, te u pripremi i samoj implantaciji. Korištenjem stromalnih stanica endometrija uzgajanih u kulturi potvrđena je postavljena hipoteza da je Dkk-1 reguliran progesteronom. Regulaciju ekspresije Dkk-1 moguće je dokazati nakon tri dana djelovanja progesterona, te se ona pojačava duljinom trajanja obrade. Ciklički AMP, uz progesteron nije imao utjecaj na ekspresiju Dkk-1, dokazujući da ekspresija nije regulirana signalnim putem protein-kinaze A. Povišenu ekspresiju Dkk-1, nakon djelovanja progesterona, moguće je inhibirati dodatkom antagonista progesteronskih receptora RU486 ili uklanjanjem progesterona iz medija, što ukazuje da je Dkk-1 reguliran progesteronom. Dokazano je da estrogeni nemaju utjecaj na ekspresiju Dkk-1 u stromalnim stanicama endometrija. Aktivacija Wnt signalnog puta u stromalnim stanicama endometrija može se postići dodatkom kondicioniranog medija koji sadrži aktivni Wnt-3a protein (Wnt-3a-CM). Nakon obrade stromalnih stanica dodatkom Wnt-3a-CM dolazi do akumulacije β -katenina koje rezultira aktivacijom ciljanih gena Wnt signalnog puta. Oligonikleotidnom bio-čip tehnologijom definirani su poznati geni stimulirani Wnt signalnim putem: cyclin D1, TCF, LEF, APCDD1, ali su otkriveni i novi ciljani geni Wnt signalnog puta u stromalnim stanicama endometrija. Uloga ciljanih gena Wnt signalnog puta u endometriju maternice je u međustaničnim komunikacijama koje uvjetuju decidualizaciju stromalnih stanica, te pripremu endometrija za implantaciju.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA