Naslov
Procjena genotoksičnosti irinotekana metodom komet testa
(Assessment of irinotecan genotoxicity using the comet assay)

Autori
Pleša, Nina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
23.03

Godina
2005

Stranica
51

Mentor
Kopjar, Nevenka

Ključne riječi
komet test; limfociti; irinotekan; citotoksični lijekovi; genotoksični učinci; oštećenje i popravak DNA
(alkaline comet assay; lymphocyte; irinotecan; antineoplastic drugs; genotoxic effects; DNA damage and DNA repair)

Sažetak
Metodom komet testa u alkalnim i neutralnim uvjetima istraženi su genotoksični učinci terapijskih koncentracija irinotekana na izolirane ljudske limfocite periferne krvi. Primjenom tehnike bojenja s fluorescentnim bojama etidij bromidom i akridin oranžom utvrđeno je da irinotekan u uvjetima in vitro izaziva značajan porast postotka stanica u apoptozi u usporedbi s kontrolom, a viša koncentracija (350 mg/m2) ujedno izaziva veću učestalost apoptoza i nekroza u usporedbi s nižom koncentracijom (180 mg/m2). U svim promatranim uzorcima utvrđena su odstupanja dužine repa, postotka DNA u repu, repnog momenta te ukupne površine kometa u usporedbi s odgovarajućim kontrolama. Dinamika oštećenja izazvanih irinotekanom i njihov popravak mijenjaju se u ovisnosti o vremenu proteklom nakon tretmana, a ovisni su i o rastu stanica u kulturi. Podaci dobiveni primjenom ove izvedbe komet testa nedvojbeno ukazuju na doprinos apoptoza porastu razine utvrđenih primarnih oštećenja DNA. Rezultati dobiveni na limfocitima ukazuju da su i stanice u fazi mirovanja (G0) također osjetljive na djelovanje irinotekana, iako on najspecifičnije oštećuje stanice u S-fazi. Usporedba ukupnih površina kometa pokazala je da irinotekan izaziva podjednak stupanj primarnih oštećenja limfocitne DNA, neovisno o primijenjenoj koncentraciji, ukazujući da je za njegovu toksičnost presudan mehanizam djelovanja, a ne doza. Dobiveni rezultati potvrđuju visoku osjetljivost i specifičnost obje izvedbe komet testa i ukazuju na mogućnost njihove primjene u pretkliničkim istraživanjima lijekova.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA