Naslov
Kloniranje, ekspresija i karakterizacija fuzijskog proteina receptora za faktor nekroze tumora-alfa (TNFR-alfa) i imunoglobulina G
(Cloning, Expression and Characterization of the Tumor Necrosis Factor-alpha Receptor (TNFR-alpha) and Immunoglobulin G Fusion Protein)

Autori
Smilović, Vanja

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
19.12

Godina
2001

Stranica
70

Mentor
Weygand-Đurašević, Ivana

Neposredni voditelj
Antolović, Roberto

Ključne riječi
mišji ENBREL; štakorski ENBREL; mišji fuzijski protein TNFR-a i IgG-a; štakorski fuzijski protein TNFR-a i IgG-a; bakulovirusni ekspresijski sustav; TNF-alfa
(mouse ENBREL; rat ENBREL; mouse TNFR and IgG fusion protein; rat TNFR and IgG fusion protein; baculovirus expression sistem; TNF-alpha)

Sažetak
Izolirana RNA iz mišjih makrofaga i štakorskih bubrega reverzno je transkribirana. Lančanom reakcijom polimerazom umnožena je DNA TNF-alfa receptora (TNFR p55) i imunoglobulina G (IgG3) miša i štakora. Umnoženi fragmenti DNA su ugrađene u ekspresijski vektor pFastBac1 i eksprimirane u bakulovirusnom sustavu. Ekspresija fuzijskih proteina TNF-alfa-receptora i imunoglobulina G miša i štakora (mišjeg i štakorskog ENBREL-a) potvrđena je western blot analizom. Proteini su pročišćeni afinitetnom kromatografijom, a njihova sposobnost vezanja TNF-alfa dokazana je kompetitivnim ELISA testom (enzime-linked immunosorbent assay). Neutralizacija lučenja TNF-alfa od strane mišjeg fuzijskog proteina određena je ELISA testom na mononuklearnim stanicama periferne krvi(hPBMC) i mišjim makrofagima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA