аЯрЁБс>ўџ ?Bўџџџ@џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџьЅСG П’ bjbjŽйŽй .ьГьГ’џџџџџџ]њњњњњњњ  I Ж2HHHHHHHі ј ј ј ј ј ј $џ єѓ N -њHHHHH hњњHH2hhhHњHњHі њњњњHі hŽhі њњі H& рnЇlХXі Poster 3 Sudden Senescence Syndrome and Telomere Shortening M. Ferenac1, D. Polan ec2, & I. Rubelj1 1Laboratory for Experimental Cancerology, Department of Molecular Genetics, Ruer Boakovi Institute, Bijenu ka cesta 54, HR-10000 Zagreb, Croatia; 2Pliva d.d., Research Institute, Laboratory of Flow Cytometry and Cell Sorting, Prilaz Baruna Filipovia 25, HR-10000 Zagreb, Croatia ( HYPERLINK "mailto:rubelj@rudjer.irb.hr" rubelj@rudjer.irb.hr) Telomeres are distinctive structures, composed of a repetitive DNA sequences and associated proteins that cap the ends of linear chromosomes. Telomeres are essential for maintaining the integrity and stability of eukaryotic genomes. They shorten by every cell cycle until they reach critical length recognized by checkpoints after which cell enter replicative senescence. Individual senescent cells appear in the culture in sudden and stochastic fashion due to phenomenon referred to as sudden senescence syndrome (SSS). Fraction of senescent cells gradually increases until eventually entire culture cease further divisions. To determine whether individual senescent cells have accelerated telomere shortening, as suggested in a recent literature, we stained young cell culture (population doublings ~25) with DiI which incorporates in membranes of living cells. After each cell division dye distributes among two daughter cells and dilutes to 50% its original abundance. We used flow cytometry in order to separate actively dividing cells (young) from those that cease further divisions (sudden senescence) and analyzed their telomere length by Southern blot analysis. It appeared that these two subpopulations of cells have same telomere lengths. Thus, our result does not support previously proposed accelerated telomere shortening, but indicates that abrupt shortening of one (or few) telomere(s) could cause the onset of sudden senescence observed in a young cell cultures. |~’”ЎАЪаіјXZ\„†’ §љ§ѕя§ы§ы§ы§ф§кфеф§0JmH jUmH  jUmH H*mH  >*H*mH >*mH ;mH mH |~ЮŠŒŽ  ‘ ’ ќќќќќќќќљљљќќќ$$|~ЮŠŒŽ  ‘ ’ ќљіѓ№эъхрлиевџџџ‘џџџ’џџџZ[\ Кту ,1hА‚. АЦA!А"А# $ %ААФАФ ФзDаЩъyљКЮŒ‚ЊKЉ rubelj@rudjer.irb.hrрЩъyљКЮŒ‚ЊKЉ 8mailto:rubelj@rudjer.irb.hr [8@ёџ8 NormalCJ_HaJmH sH tH J@J Heading 1$dhЄрЄh@&5CJmH sH L@L Heading 2$$dhЄhЄ№@&a$ 5mH sH <A@ђџЁ< Default Paragraph Font.U@Ђё. Hyperlink >*B*phџ2Q 2 Body Text 3$CJ,J ,Subtitle5mH *B`"* Body TextmH’џџџџ’ ’ ’ ‚­Т’Xџ„””џџ AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator%E:\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB-3.docџ@€МGј(’ppp@G‡z€џTimes New Roman5€Symbol3& ‡z€џArial"1ˆ№аhC–fC–f> $№ЅРДД0dЊџџP-29 Administratorўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0l˜ЈДРЬиш   ( 4 @LT\dфP-29f-29 292929NormalAdministratoro2miMicrosoft Word 8.0@@nу‡lХ@nу‡lХ>ўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎ0ь hp|„Œ” œЄЌД М Эфo ЊГ  P-29 Title,(RZВ _PID_GUID _PID_HLINKSфAN{53E53ACF-D0C0-4BD5-BEC0-F62A8D314BFF}Ap1Pmailto:rubelj@rudjer.irb.hr ўџџџўџџџўџџџ !"#$ўџџџ&'()*+,ўџџџ§џџџ/ўџџџўџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџRoot Entryџџџџџџџџ РFРЄ№ІlХ@RЇlХ1€Data џџџџџџџџџџџџ 1TableџџџџWordDocumentџџџџ.SummaryInformation(џџџџџџџџџџџџDocumentSummaryInformation8џџџџџџџџ%CompObjџџџџџџџџџџџџjџџџџџџџџџџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9Вqўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0l˜ЈДРЬиш   ( 4 @LT\dфP-29f-29 292929NormalAdministratoro3miMicrosoft Word 8.0@вIk@nу‡lХ@2Зє*lХ>ўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎ0ь hp|„Œ” œЄЌД М Эфo ЊГ  P-29 Title,(RZВ _PID_GUID _PID_HLINKSфAN{53E53ACF-D0C0-4BD5-BEC0-F62A8D314BFF}Ap1Pmailto:rubelj@rudjer.irb.hr [8@ёџ8 NormalCJ_HaJmH sH tH JJ Heading 1$dhЄрЄh@&5CJmH sH LL Heading 2$$dhЄhЄ№@&a$ 5mH sH <A@ђџЁ< Default Paragraph Font.U@Ђё. Hyperlink >*B*phџ2Q2 Body Text 3$CJ,J,Subtitle5mH *B@"* Body TextmH8Y@28 Document Map-D OJQJ’џџџџ >?gХЦЧ‘”œ€€€€˜€€€˜€ €€˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?’ ’ ’ ‚­Т’Xџ„ %&=” %&=”џџ AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator%E:\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB-3.doc Administrator%E:\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB-3.docџ@€ffШЇKўўff@&;€м %&=>?g‘’00№01№11"№1&18№1<1J№1L0z№0|0~№1Ю00@0"@G‡z€џTimes New Roman5€Symbol3& ‡z€џArial5& ‡z€џTahoma"1ˆ№аhC–fЧC–f> !№ЅРДД0dЊ џџP-29 AdministratorьЅСG П’ bjbjŽйŽй .ьГьГ’џџџџџџ]444444H€€€€ Œ Hx ьЄКККККККh j j j j j j $d єXNŽ ъ4КККККŽ :44ККЄ:::К@4К4Кh HH4444Кh :.:h 44h К˜ аЈ +lХH8€њ@h Root Entryџџџџџџџџ РFРЄ№ІlХаЈ +lХK€Data џџџџџџџџ 1TableџџџџWordDocumentџџџџ=.џџџџџџџџ ўџџџўџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџ>A§џџџўџџџўџџџDEFGHIJLCMўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџSummaryInformation(џџџџџџџџџџџџKœDocumentSummaryInformation8џџџџџџџџA\CompObjџџџџџџџџџџџџj0TableџџџџџџџџџџџџІўџџџ  !"#$%&'()*+,-./0123456789:;<=>?@ўџџџBCDEFGHIJўџџџLMNOPQўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџy Text 3$CJ,J,Subtitle5mH *B@"* Body TextmH8Y@28 Document Map-D OJQJ’џџџџ >?gХЦЧ‘”œ€€€€˜€€€˜€ €€˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?˜€?’ ’ ’ ‚­Т’Xџ„ %&=” %&=”џџ AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd Administrator[C:\WINNT\Profiles\ADMINI~1.000\LOCALS~1\Temp\AutoRecovery save of Sazeci postera MB IRB.asd AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc AdministratorUC:\WINNT\Profiles\Administrator.BALTAZAR.000\Desktop\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB.doc Administrator%E:\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB-3.doc Administrator%E:\RUBELJ\Sazeci postera MB IRB-3.docџ@€ffШЇKўўff@&;€м %&=>?g‘’00№01№11"№1&18№1<1J№1L0z№0|0~№1Ю00@0"@G‡z€џTimes New Roman5€Symbol3& ‡z€џArial5& ‡z€џTahoma"1ˆ№аhC–fЧC–f> !№ЅРДД0dЊ џџP-29 AdministratorўџеЭеœ.“—+,љЎDеЭеœ.“—+,љЎ0ь hp|„Œ” œЄЌД М Эфo ЊГ  P-29 Title,(RZВ _PID_GUID _PID_HLINKSфAN{53E53ACF-D0C0-4BD5-BECўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9Вq [8@ёџ8 NormalCJ_HaJmH sH tH JJ Heading 1$dhЄрЄh@&5CJmH sH LL Heading 2$$dhЄhЄ№@&a$ 5mH sH <A@ђџЁ< Default Paragraph Font.U@Ђё. Hyperlink >*B*phџ2Q2 Bod0-F62A8D314BFF}Ap1Pmailto:rubelj@rudjer.irb.hrўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0l˜ЈДРЬиш   ( 4 @LT\dфP-29f-29 292929NormalAdministratoro3miMicrosoft Word 8.0@вIk@nу‡lХ@2Зє*lХ>