Naslov
Imunokemijko određivanje azitromicina
(Immunochemical detection of azithromycin)

Autori
Krilov, Lada

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
04.06

Godina
2002

Stranica
54

Mentor
Mildner, Boris

Ključne riječi
afinitetna kromatografija; azitromicin; ELISA; imunogen
(affinity chomatography; azythromicin; ELISA; immunogen)

Sažetak
U svrhu uspostavljanja imunokemijskog određivanja azitromicina, proizvedena su anti-azitromicinska protutijela u kunićima. Priređen je derivat azitromicina (PL 8478) koji se preko amino skupine vezeo na BSA. Imunogen A pripremljen je vezanjem PL 8478 na BSA pomoću 1-etil-3-3-(dimetilaminopropil) karbodiimida, a imunogeni B i C vezanjem pomoću di-N-hidroksisukcinimidnog estera suberinske kiseline. Kod imunogena C upotrijebljen je kationizirani BSA. Kunići imunizirani s tri imunogena (tri kunića po grupi, 0, 1 mg/kg) proizveli su anti-PL 8478 i anti-BSA protutijela. Titar protutijela u imunom serumu određen je ELISA testom. Imunogen C izazvao je najjači i najspecifičniji imuni odgovor. ELISA testom s imunim serumom određen je azitromicin u puferu (0, 05 - 10 ug/ml), u štakorskom serumu (0, 1 - 1, 2 ug/ml) i homogenatu štakorske jetre (0, 1 - 0, 8 ug/ml). Nije dokazana unaksna reakcija sa srodnim antibioticima eritromicinom, klaritromicinom i roksitromicinom u imunom serumu. Imuni serum pročišćen afinitetnom kromatografijom, uz upotrebu BSA-seferoza kolone za uklanjanje anti-BSA protutijela i protein G-sefaroza kolone za izdvajanje imunoglobulina G. ELISA testom s pročišćenim imunim serumom određen je azitromicin u štakorskom serumu i homogenatu štakorske jetre (0, 1 - 2, 5 ug/ml).

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Matematika

Napomena
Rad je izrađen u laboratoriju za farmakokinetiku i metabolizam, Istraživanje, PLIVA d.d., Prilaz baruna Filipovića 25, Zagreb. Rad nije financiran od strane Ministarstva znanosti republike Hrvatske.

POVEZANOST RADA