Naslov
Uspješnost stimulacije jajnika krava u postupku transvaginalne ultrazvučne punkcije i uzgoja in vitro goveđih zametaka
(The efficiency of ovarian stimulation in cows used for transvaginal ultrasound aspiration of oocytes and culture in vitro of bovine embryos)

Autori
Getz, Iva

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Veterinarski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
18.02

Godina
2004

Stranica
123

Mentor
Tomašković, Antun

Ključne riječi
Krava; stimulacija jajnika; dominantni folikul; transvaginalna ultrazvučna punkcija jajnika; jajna stanica; oplodnja in vitro; uzgoj in vitro; goveđi zametak
(Cow; ovarian stimulation; dominant follicle; transvaginal ultrasound aspiration; oocyte; fertilization in vitro; culture in vitro; embryo)

Sažetak
IVA GETZ USPJEŠNOST STIMULACIJE JAJNIKA KRAVA U POSTUPKU TRANSVAGINALNE ULTRAZVUČNE PUNKCIJE I UZGOJA IN VITRO GOVEĐIH ZAMETAKA SAŽETAK DOKTORSKE DISERTACIJE Dvadeset i četiri plotkinje simentalske pasmine: od toga 8 spolno zrelih junica u dobi od 16 do 24 mjeseca i 16 krava u dobi od 2, 5 do 6 godina, sinkronizirane su i nasumice podijeljene su u tri grupe po osam životinja. Prva grupa stimuliranih davateljica obuhvaćala je junice (n=4) i krave (n=4) kod kojih smo aspirirali jajne stanice nakon dvodnevne stimulacije jajnika s preparatom folikulostimulirajućeg hormona (Folltropin&reg ; -V, Vetrepharm Inc., London, Canada) kojeg smo injicirali davateljicama i.m. dva puta dnevno u jednakim dozama tijekom 2 dana (ukupna doza: 200 mg NIH-FSH-P1). Transvaginalnu ultrazvučnu aspiraciju jajnih stanica izvršili smo 48 sati nakon zadnje FSH injekcije. Postupak smo ponavljali jedanput tjedno tijekom 4 uzastopna tjedna (ukupno 4 punkcije po svakoj davateljici). Druga grupa stimuliranih davateljica obuhvatila je junice (n=5) i krave (n=3) kod kojih smo aspirirali jajne stanice za IVP nakon stimulacije jajnika s FSH, ali uz prethodnu aspiraciju dominantnog folikula prije započinjanja stimulacijskog tretmana (DF-/FSH skupina). Kao i u prethodnoj grupi, transvaginalnu ultrazvučnu aspiraciju jajnih stanica izvršili smo 48 sati nakon zadnje FSH injekcije. Postupak smo ponovili svaka dva tjedna, tijekom dvomjesečnog razdoblja (ukupno četiri punkcije po svakoj davateljici). U kontrolnoj skupini krava u ciklusu (n=8) su jajne stanice aspirirane dva puta tjedno tijekom mjesec dana, bez prethodne hormonske stimulacije jajnika. U FSH skupini davateljica aspirirano je ukupno 257 jajnih stanica iz 378 folikula, odnosno prosječno 8, 03 jajne stanice po punkciji. Od toga su 202 jajne stanice ušle u postupak dozrijevanja in vitro, odnosno prosječno 6, 31 jajnih stanica po aspiraciji. Broj jajnih stanica za IVM kretao se u širokim granicama od najmanje dobivene 1 do najviše 21 jajne stanice po aspiraciji. U DF-/FSH skupini davateljica aspiracija dominantnog folikula prije započinjanja FSH tretmana prouzročila je raniji rast najmanjih folikula promjera 2 do 5 mm u prvih 12 sati nakon zadnje FSH injekcije, no ukupan broj folikula po kategorijama nije se razlikovao 24 i 48 sati nakon završetka stimulacijskog tretmana. U ovoj smo skupini aspirirali smo ukupno 243 jajne stanice iz 375 folikula, odnosno prosječno 7, 59 jajne stanice po punkciji. No, treba napomenuti da je u ovoj skupni davateljica transvaginalna ultrazvučna aspiracija jajnih stanica rađena svaki drugi tjedan, dok je u prethodnoj, FSH skupini rađena svaki tjedan. U ovoj skupini ukupno je 183 jajnih stanica ušlo u IVM, odnosno 5, 71 po punkciji. Od krava u ciklusu (kontrolna skupina) aspirirali smo ukupno 150 jajnih stanica iz 299 folikula, odnosno prosječno 4, 69 jajne stanice tjedno. Nakon kategorizacije 132 jajne stanice ušle su u daljnji postupak dozrijevanja in vitro, odnosno 4, 12 jajne stanice tjedno. Nisu utvrđene statistički značajne razlike u broju aspiriranih jajnih stanica prve, druge, treće i četvrte kategorije između stimuliranih i nestimuliranih davateljica, ali je kod stimuliranih davateljica u obje skupine utvrđeno statistički signifikantno više (P<0, 05) ekspandiranih jajnih stanica koje nisu ušle u IVM postupak. Ukupan broj stanica koje su ušle u IVM postupak, odnosno jajne stanice prve, druge i treće kategorije, bio je statistički signifikantno niži (P<0, 05) kod nestimuliranih krava. U FSH skupini davateljica uspješno je oplođeno ukupno 166 jajnih stanica, odnosno 79, 6%. Sedmog dana uzgoja in vitro dobili smo ukupno 97 morula i blastocista, odnosno 3, 03 morule i blastociste po punkciji ili 44, 1%. S obzirom da smo postupak kod svake davateljice ponavljali po četiri puta, ukupno smo uzgojili in vitro 12, 12 morula i blastocista po davateljici. U DF-/FSH skupini uspješno je oplođeno ukupno 162 jajnih stanica, odnosno 86, 4%. Sedmog dana uzgoja in vitro dobili smo ukupno 70 morula i blastocista, odnosno 2, 18 morule i blastociste po punkciji ili 35, 1%. S obzirom da smo postupak kod svake davateljice ponavljali po četiri puta, ukupno smo in vitro uzgojili 8, 75 morula i blastocista po davateljici. Kod krava u ciklusu (kontrolna skupina) uspješno su oplođene 101 jajne stanice, odnosno 74, 9%. Sedmog dana uzgoja in vitro dobili smo ukupno 64 morula i blastocista, odnosno 2, 0 morule i blastociste tjedno. Tijekom 4 tjedna po davateljici smo uzgojem in vitro dobili ukupno 8, 0 kvalitetnih morula i blastocista. Nije utvrđena statistički značajna razlika u broju morula i blastocista 7. dana uzgoja in vitro između pojedinih skupina, ali je utvrđena statistički značajna razlika (P<0, 05) u broju degeneriranih blastocista 7. dana uzgoja in vitro između nestimuliranih (kontrola) i stimuliranih plotkinja. Nakon hormonske stimulacije davateljica dobili smo više jajnih stanica, ali je među njima bio i veči broj jajnih stanica lošije kvalitete, koje su bile isključene iz daljnjeg postupka. S obzirom da osim uspjeha aspiracije, na širu primjenu transvaginalne ultrazvučne aspiracije jajnih stanica utječe i isplativost i cijena čitavog postupka, možemo preporučiti kao metodu izbora u našim uvjetima OPU krava i junica u ciklusu, bez hormonske stimulacije.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Veterinarska medicina

POVEZANOST RADA