Naslov
Primjena životinjskih stanica u proizvodnji cjepiva protiv bolesti Aujeszkoga
(Application of animal cell culture in production of vaccine against Aujeszky's disease)

Autori
Gaurina Srček, Višnja

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
10.06

Godina
2003

Stranica
106

Mentor
Kniewald, Zlatko

Ključne riječi
proizvodnja cjepiva; stanična linija BHK 21 C13; činitelji rasta; virus bolesti Aujeszkoga
(vaccine production; BHK 21 C13 cell line; growth factors; Aujeszky's disease virus)

Sažetak
Kulture životinjskih stanica koriste se u biotehnološkoj proizvodnji velikog broja korisnih proizvoda za terapijske, dijagnostičke i istraživačke svrhe. Značajnu skupinu ovih proizvoda čine cjepiva za primjenu u ljudi i životinja koja se proizvode pomoću diploidnih ili na kontinuiranim staničnim linijama. Prinosi proizvoda koji se postižu u kulturi životinjskih stanica često su niski zbog kratkog trajanja produktivne faze te niske gustoće stanica što je nepoželjno za sam proces proizvodnje. Poboljšanja koja se mogu postići u tom kontekstu vezana su za bolje oblikovanje hranjive podloge za uzgoj stanica i samu kontrolu procesa. U radu je korištena BHK 21 C13 stanična linija u cilju proizvodnje biomase stanica za proizvodnju osnove za cjepivo protiv bolesti Aujeszkoga. Također je ispitan učinak činitelja rasta izdvojenog iz mozga svinje na dinamiku rasta BHK 21 C13 stanica. Za vrijeme proizvodnje biomase BHK 21 C13 stanica praćeni su parametri poput specifične brzine rasta, vremena udvostručenja biomase stanica te prinos stanica. Istovremeno su u hranjivoj podlozi za uzgoj određivani utrošci glukoze i glutamina kao izvora energije te nastajanje metabolita laktata i amonijaka. Ispitan je i učinak činitelja rasta izdvojenog iz mozga svinje postupcima taloženja amonijevim sulfatom, ionsko-zamjenskom kromatografijom te afinitetnom kromatografijom na HiTrap Heparin HP koloni. Rezultati su pokazali da je dodatak pročišćenog činitelja rasta u koncentraciji od 0, 1 mg/mL hranjive podloge za uzgoj ostvario prinos stanica od 18, 7x10^5 st/mL dok je za kontrolni uzorak prinos iznosio 10, 1x10^5 st/mL. Istovremeno, vrijeme udvostručenja biomase stanica iznosilo je 17, 8 h za kontrolni uzorak te 13, 86 h za uzorak s dodanim pročišćenim činiteljem rasta. Dodatkom pročišćenog činitelja rasta proizvedeno je 85% više biomase stanica uz smanjenje dodanog seruma za 40% Tijekom proizvodnje osnove za cjepivo protiv bolesti Aujeszkoga uspoređeni su jednostruki i višestruki postupak korištenja biomase BHK 21 C13 stanica. Kod jednostrukog postupka dobiven je veći titar virusa, ali je višestruki postupak pokazao da se u kraćem vremenu i višekratnim korištenjem biomase stanica može proizvesti veća količina cjepiva s ukupno povećanom rentabilnošću od 50%. Istovremeno se kod stanica koje su rasle u prisutnosti činitelja rasta pokazala veća otpornost na ulazak i umnožavanje virusa u stanicama.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA