Pregled bibliografske jedinice broj: 1282980
U potrazi za termostabilnijim enzimima za industrijsku primjenu: rekonstrukcija drevnih predaka C-tipa halogenhidrin-dehalogenaze
U potrazi za termostabilnijim enzimima za industrijsku primjenu: rekonstrukcija drevnih predaka C-tipa halogenhidrin-dehalogenaze, 2023. (rektorova nagrada).
CROSBI ID: 1282980 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
U potrazi za termostabilnijim enzimima
za industrijsku primjenu: rekonstrukcija
drevnih predaka C-tipa halogenhidrin-dehalogenaze
(In search of more thermostable enzymes for
industrial use: reconstruction of ancient
ancestors of C-type halohydrin dehalogenase)
Autori
Bolješić, Leo ; Kos, Krešimir ; Petrić, Ivana
Vrsta, podvrsta
Ostale vrste radova, rektorova nagrada
Godina
2023
Ključne riječi
HheC, rekonstrukcija filogenetskog stabla, HHDH, termostabilnost, specifična aktivnost, PNSHH
(HheC, phylogenetic tree reconstruction, HHDH, thermostability, specific activity, PNSHH)
Sažetak
Korištenje novih i održivih principa „zelenog inženjerstva“ posljednjih godina postaje sve snažniji trend u industriji, pri čemu optimizacija enzima za industrijske proce predstavlja nove prilike za njihovu primjenu. Središnji cilj ovog rada bila je rekonstrukcija filogenetskog stabla halogenhidrin-dehalogenaza (HHDH) te sinteza i karakterizacija predaka C-tipa HHDH, kako bi se pronašli termostabilniji enzimi s potencijalom za industrijsku primjenu. U ovom radu su s tim ciljem uspješno uzgojeni drevni proteini, preci HheC enzima iz Agrobacterium radiobacter AD1: Tipovi N122 (direktni predak HheC), N124 (direktni predak N122) i N134 (daljnji predak svih HHDH enzima). Nakon što su uspješno sintetizirani i pročišćeni, ispitana su njihova svojstva od ključne važnosti za njihovu potencijalnu katalitičku primjenu. Najveću vrijednost specifične aktivnosti prema PNSHH supstratu pokazali su preci N124 i N134, te time pokazali veću aktivnost u odnosu na sami HheC enzim. Termički najstabilniji na temelju DSF mjerenja pokazao se N122, čija je temperatura taljenja (Tm) bila za oko 20°C veća od HheC (Tm oko 60°C), dok N124 i N134 sa Tm od oko 55 i 57 °C nisu pokazali povećanje termostabilnosti. Sličan trend pokazala je inkubacija pri 25 i 50°C, gdje je u oba slučaja najveću stabilnost pri obje temperature pokazao N122, što je bilo insinuirano iz samih DSF mjerenja. N124, osim što se prethodno pokazao kao temperaturno najmanje stabilnim, se ujedno pokazao i najmanje stabilan kod inkubacije. Svaki od ispitivanih predaka pokazali su određeno poboljšanje u odnosu na divlji HheC tip, što ukazuje na važnost ovog istraživanja za buduće potrebe.
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Kemijsko inženjerstvo
Napomena
Mentor rada: prof. dr. sc. Zvjezdana Findrik
Blažević
Neposredni voditelj: dr. sc. Nevena Milčić
POVEZANOST RADA
Projekti:
MZO-RH-AT-12 - BioFragrance: Enzimsko inženjerstvo i procesno inženjerstvo u sintezi mirisnih spojeva iz obnovljivih izvora (BioFragrance) (Findrik Blažević, Zvjezdana, MZO ) ( CroRIS)
Ustanove:
Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije, Zagreb
Profili:
Krešimir Kos
(autor)