Naslov
Prednosti tekućinske kromatografije ultravisoke učinkovitosti u razvoju stabilitetno-indikativne metode za kontrolu kakvoće nepafenaka
(Advantages of ultra performance liquid chromatography in development of nepafenac UHPLC stability indicating method)

Autori
Ursić, Ivana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, postdiplomski specijalisticki

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
10.03

Godina
2017

Stranica
51

Mentor
Nigović, Biljana

Ključne riječi
Nepafenak, onečišćenja, stabilitetno-indikativna UHPLC metoda
(Nepafenac, impurities, stability-indicating UHPLC method)

Sažetak
CILJ ISTRAŽIVANJA: Cilj istraživanja je analiza studije o razvoju i validaciji stabilitetno- indikativno UHPLC metode za određivanje kontrole kakvoće nepafenaka razvijene u Pliva Hrvatska d.o.o te usporedba s postojećom internom HPLC metodom s naglaskom na prednosti korištenja UHPLC metoda i tehnike masene spektrometrije (LC-MS/MS). Obraditi će se i sve literaturno poznate kromatografske metode razvijene i korištene za analitičko ispitivanje nepafenaka u farmaceutskim formulacijama. MATERIJAL/METODE: Istraživanja provedena u okviru ovog specijalističkog rada obuhvaćaju pregled svih dostupnih publikacija koristeći dostupne bibliografske baze podataka i servise (Medline/PubMed, ScienceDirect, EMBASE i drugih), uz primjenu ključnih riječi poput: nepafenac, quality control, UHPLC, HPLC, Stability indicating study, forced degradation i sl. Napravljena je detaljna studija razvijene UHPLC metode za stabilitetna ispitivanja aktivne farmaceutske supstancije nepafenaka, te prednosti korištenja iste naspram postojeće HPLC metode također razvijene u odjelu Istraživanja i razvoja TAPI R&D Pliva Hrvatska d.o.o. Za potrebe razvoja stabilitetno-indikativne metode uvjeti prisilne razgradnje su preuzeti iz ICH Q1A i ICH Q1B vodiča za farmaceutsku industriju: kisela i bazična razgradnja, oksidacija, povišena temperatura, fotoliza te povišena vlažnost. Korišten je Waters UHPLC H-Class s PDA detektorom i gradijentnom pumpom. Optimalna kromatografska kolona je Waters Acquity BEH C18, dimenzija 100 mm x 2, 1 mm i promjera čestica 1, 7 μm. Za evaluaciju podataka korišteno je Waters Empower 2 CDS upravljačko sučelje. Detekcija nepoznatih onečišćenja je izvršena tehnikom masene spektroskopije, uz koristenje Agilent 6490 LC- MS/MS sistema spregnutog s Agilent 1290 UHPLC te Agilent MassHunter 2003-2007 Data Acquisition for Triple Qual B.01.04 (B84) upravljačko sučelje. REZULTATI: Aktivna farmaceutska supstancija nepafenak je podvrgnuta studiji prisilne razgradnje (kisela i bazična hidroliza, oksidacija, povišena vlažnost i temperatura, utjecaj svijetlosti) pod instrumentalnim uvjetima novorazvijene UHPLC metode za određivanje sadržaja i onečišćenja da bi se ispitala prikladnost metode za stabilitetna ispitivanja. Gradijentna UHPLC-UV metoda odjeljuje nepafenak i sva onečišćenja (2-aminobenzofenon, Cl-tionepafenak, tionepafenak, Cl-nepafenak, hidroksi-nepafenak i ciklički nepafenak) koristeći kromatografsku kolonu Waters Acquity BEH C18. Valna duljina detekcije je 235 nm, protok pokretne faze je 0, 6 mL/min. Razlučivanje između pikova nepafenaka i detektiranih onečišćenja je veće od 2. Metoda je dokazano selektivna, linearna, precizna, točna, robusna, a određene su granice detekcije i kvantifikacije. Linearnost je dokazana visokim faktorom korelacije između površina pikova i koncentracija analita koji je iznosio 0, 999 za sve analite. Granica detekcije je potvrđena za sve komponente i iznosi 0, 005%, relativno u odnosu na koncentraciju ispitivane otopine uzorka od 1, 0 mg/mL. Značajna razgradnja je zabilježena u kiseloj, bazičnoj i oksidativnoj razgradnji. Razgradni produkti su identificirani tehnikom masene spektometrije, dva su identificirana kao poznata procesna onečišćenja (hidroksi-nepafenak i ciklički nepafenak), a identificirana su i četiri nova razgradna produkta. ZAKLJUČAK: Ukazana je prednost razvoja metode za tekućinsku kromatografiju ultra visoke učinkovitosti nad metodama za tekućinsku kromatografiju visoke učinkovitosti na primjeru nepafenaka. Studija uvelike doprinosi prikupljanju informacija o stabilnosti same supstancije (ubrzana razgradnja), procesnim onečišćenjima i potencijalnim razgradnim produktima (spregnuta tehnika LC-MS/MS). Razvijena UHPLC metoda ima prednost nad svim literaturno poznatim, zbog separacije svih sastavnica u vremenu trajanja analize 5 minuta.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA