Naslov
Procjena epigenetičkih promjena u 3D modelu razvoja pupoljaka udova štakora in vitro
(Assesment of epigenetic changes in 3D model of rat limb buds development in vitro)

Autori
Bunoza Paula ; Katušić Bojanac Ana (mentor)

Vrsta, podvrsta
Ostale vrste radova, dekanova nagrada

Godina
2020

Ključne riječi
Ključne riječi: pupoljak uda, DNA metilacija, in vitro kultura, hondrogeneza
(limb bud, DNA methylation, in vitro culture, chondrogenesis)

Sažetak
Cilj rada bio je ispitati dinamiku globalne metilacije DNA pupoljaka prednjih i stražnjih udova zametka štakora izoliranih 13. i 14. dana gestacije te kultiviranih in vitro u modelu kulture organa u periodu od 14 dana, kako bi utvrdili međuzavisnost epigenetičkih promjena i napretka diferencijacije u kulturi. DNA je izolirana iz fiksiranih uzoraka uklopljenih u parafin, a nakon bisulfitne konverzije i PCR-a, pirosekvenciranjem je određen postotak metilacije repetitivnih slijedova koji predstavljaju globalnu metilaciju. Parafinski rezovi uzoraka obojani su Safraninom O kako bi se utvrdio napredak hondrogeneze tijekom kulture. U pupoljcima udova starim 13 dana, metilacija značajno raste tijekom kulture, s najvećim porastom 3. dana, dok kod 14. dana starih pupoljaka nema značajnog porasta, a čak su i hipometilirani u odnosu na mlađi stadij razvoja. U kulturama bez seruma, napredak hondrogeneze je slabiji, poglavito kod stražnjih udova, a i porast metilacije tijekom kulture značajan je samo kod prednjih udova obje starosti, što znači da su stražnji udovi osobito 13., no i 14. dana gestacije osjetljiviji na uvjete in vitro. Rezultati ovog rada doprinose poznavanju utjecaja uvjeta kultivacije na epigenetičke procese koji se odvijaju tijekom diferencijacije hrskavice in vitro te su doprinos istraživanjima dobivanja hrskavice iz matičnih stanica za potrebe transplantacijske medicine.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

Napomena
Dekanova nagrada 2020.

POVEZANOST RADA