Naslov
Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom, proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka
(The role of protein ITIH5 in resistance to vemurafenib targeted therapy, proliferation and activity of major signaling pathways in human melanoma cell lines)

Autori
Stepić, Doris

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet / Biološki odsjek

Mjesto
Zagreb

Datum
27.02

Godina
2023

Stranica
65

Mentor
Vlašić, Ignacija ; Oršolić, Nada

Neposredni voditelj
Tadijan, Ana

Ključne riječi
melanom ; vemurafenib ; otpornost ; ITIH5 ; signalni putevi ; proliferacija
(melanoma ; vemurafenib ; resistance ; ITIH5 ; signaling pathways ; proliferation)

Sažetak
Vemurafenib je selektivni inhibitor mutiranog proteina BRAF V600E koji se javlja u 60% melanoma. Unatoč početnim obećavajućim rezultatima, ubrzo nakon liječenja vemurafenibom dolazi do pojave stečene otpornosti stanica melanoma na ovaj lijek. Stečena otpornost često je posljedica reaktivacije signalnog puta MAPK (engl. mitogen activated protein kinase) ili aktivacije alternativnog signalnog puta PI3K/AKT (engl. phosphoinositide-3- kinase/Akt). U mnogim je tumorima, uključujući melanom, uočena smanjena ekspresija gena ITIH5. Unatoč tome, njegova uloga u stečenoj otpornosti stanica melanoma na vemurafenib još nije istražena. Cilj ovog diplomskog rada bio je istražiti učinak utišavanja ovoga gena na otpornost na vemurafenib, na signalne puteve MAPK i PI3K/AKT te na proliferaciju staničnih linija melanoma čovjeka WM793B i A375M. Utišavanje gena ITIH5 provedeno je prolaznom transfekcijom stanica malim interferirajućim RNA koje ciljaju ITIH5 koristeći kalcijev fosfat. Provjera ekspresije i uspješnosti utišavanja provedena je kvantitativnom polimeraznom lančanom reakcijom (qPCR). Nakon utišavanja ITIH5 provjerena je vijabilnost i proliferacija stanica metodom MTT te razina biljega aktivnosti istraživanih signalnih puteva i proliferacije metodom Western blot. Navedene su analize pokazale da tretman vemurafenibom znatno snižava ekspresiju gena ITIH5 te da snižena ekspresija ITIH5 povećava proliferaciju u navedenim staničnim linijama melanoma čovjeka.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija, Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA