Naslov
Utjecaj proteotoksičnog stresa na agregaciju i toksičnost tau proteina čovjeka izraženog u kvascu Saccharomyces cerevisiae
(The effect of proteotoxic stress on human tau protein aggregation and toxicity expressed in yeast Saccharomyces cerevisiae)

Autori
Zubčić, Klara

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Zagreb, Hrvatska

Datum
12.12

Godina
2022

Stranica
104

Mentor
Boban, Mirta ; Šimić, Goran

Ključne riječi
agregacija tau proteina ; Alzheimerova bolest ; genetički probir ; kvasac Saccharomyces cerevisiae ; konstrukcija plazmida ; luminiscentni reporter Tau-NanoBiT ; molekulsko kloniranje ; protein tau ; proteotoksični stres ; sustav kontrole kvalitete proteina ; tau protein
(Alzheimer's disease ; genetic screening ; luminescent reporter Tau-NanoBit ; molecular cloning ; plasmid construction ; proteotoxic stress ; protein quality control system ; tau protein ; tau protein agregation ; yeast Saccharomyces cerevisiae)

Sažetak
Nakupljanje agregata tau proteina u neurofibrilarne snopiće najkarakterističnije je histopatološko obilježje Alzheimerove bolesti. U zdravim neuronima tau ima karakteristike topljivog proteina te je uglavnom vezan za mikrotubule aksona, dok u neuronima i glija stanicama zahvaćenim patološkim neurofibrilarnim promjenama tvori agregate i akumulira se u somi i dendritima te jezgrinim porama. Količina agregata i širenje neurofibrilarnih promjena u mozgu u izravnoj su korelaciji s napredovanjem bolesti i stupnjem kognitivnog oštećenja. Glavni rizični čimbenik za nastanak Alzheimerove bolesti je starenje, no točni uzroci agregacije tau proteina nisu razjašnjeni. Budući da su putevi agregacije proteina evolucijski konzervirani, radi genetičkog pristupa otkrivanju čimbenika agregacije i toksičnosti tau proteina , u ovom smo istraživanju kao stanični model odabrali kvasac Saccharomyces cerevisiae. Kako bismo bolje razumjeli mehanizme putem kojih dolazi do ranih patoloških promjena, uspostavili smo i upotrijebili molekularni alat za proučavanje oligomerizacije tau proteina u živim stanicama. Taj se alat temelji na luminiscenciji, gdje interakcija dviju molekula tau proteina rezultira komplementacijom luciferaze NanoLuc i luminiscencijom. Istražili smo dovode li različiti čimbenici, napose proteotoksični stres, do agregacije taua te ispitali toksičnost tau proteina u stanicama kvasca u uvjetima stresa. Pokazali smo da proteotoksični stres ne doprinosi oligomerizaciji i toksičnosti tau proteina eksprimiranog u stanicama kvasca. Uspostavljeni reporter Tau-NanoBiT omogućit će genetički probir čimbenika agregacije i toksičnosti tau proteina u daljnjim istraživanjima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija, Temeljne medicinske znanosti, Kliničke medicinske znanosti, Kognitivna znanost (prirodne, tehničke, biomedicina i zdravstvo, društvene i humanističke znanosti), Biotehnologija u biomedicini (prirodno područje, biomedicina i zdravstvo, biotehničko područje)

POVEZANOST RADA