Naslov
Uloga protein-kinaza aktiviranih mitogenom i proteina toplinskog šoka u oksidacijskom stresu izazvanom ekstraktom dima cigareta kod A549 alveolarnih epitelnih stanica
(The role of mitogen activated protein kinases and heat shock proteins in oxidative stress induced by cigarette smoke extract in A549 alveolar epithelial cells)

Autori
Žrvnar, Ida ; Somborac Bačura, Anita (mentorica)

Vrsta, podvrsta
Ostale vrste radova, rektorova nagrada

Godina
2019

Ključne riječi
A549 stanice, dim cigareta, HSP, MAPK
(A549 cells, cigarette smoke, HSPs, MAPKs)

Sažetak
Dim cigareta sadrži različite štetne komponente koje pridonose oštećenju tkiva i razvoju upale. Bitni regulatori stanične homeostaze, proteini toplinskog šoka (HSP), u stanici djeluju antiapoptotski, ali izlaskom iz stanice uslijed njenog oštećenja mogu potaknuti sintezu upalnih medijatora. Protein-kinaze aktivirane mitogenom (MAPK), aktivirane različitim izvanstaničnim podražajima, također doprinose razvoju upale i preživljenju. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati uzrokuje li dim cigareta oksidacijski stres i djeluje li citotoksično na alveolarne epitelne stanice A549 putem promjena u aktivaciji MAPK i ekspresiji HSP- a. A549 stanice su bile tretirane 20 % ekstraktom dima cigareta (CSE) tijekom 24 h uz i bez prisustva specifičnih inhibitora ERK-a (PD98059), p38 (SB202190) i HSP-a (KNK437). Koncentracija slobodnih tiolnih skupina proteina u stanicama te aktivnost laktat dehidrogenaze (LDH) u mediju iznad stanica određene su spektrofotometrijski, dok su aktivacija MAPK (ERK i p38) i ekspresija HSP-a (HSP27, HSP32 i HSP70) ispitane Western blot analizom. Izlaganjem A549 stanica CSE-u došlo je do smanjenja koncentracije slobodnih tiolnih skupina proteina u stanicama (P < 0, 001) te povećane aktivnosti LDH (P < 0, 05) što je upućivalo na oksidacijsko oštećenje staničnih proteina i staničnu nekrozu. U prisustvu inhibitora p38 i HSPa, aktivnost LDH se značajno smanjila u odnosu na 20 % CSE (P ≤ 0, 001), ukazujući na ulogu p38 i HSP proteina u staničnoj smrti izazvanoj CSE-om. Nadalje, sami CSE doveo je do povećane aktivacije ERK-a, p38 i HSP32. Uz korištenje inhibitora HSP-a došlo je do aktivacije ERK-a i p38. Inhibicija ERK-a u kombinaciji s CSE-om dovela je do slabe aktivacije p38 i jakog porasta HSP32. Upotrebom inhibitora p38 u kombinaciji s CSE-om došlo je do snažne aktivacije ERK-a i porasta ekspresije HSP32. Možemo zaključiti da bi MAPK i HSP proteini mogli sudjelovati u upalnom odgovoru i apoptozi primijećenima kod bolesnika koji boluju od različitih bolesti povezanih s pušenjem, kao što je kronična opstrukcijska plućna bolest.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA