Naslov
Priprema bičje sperme u postupcima oplodnje in vitro
(Bull sperm preparation for in vitro fertilization)

Autori
Samardžija, Marko

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, magistarski rad

Fakultet
Veterinarski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
13.05

Godina
2003

Stranica
103

Mentor
Cergolj, Marijan

Neposredni voditelj
Cergolj, Marijan

Ključne riječi
sperma; bik; oplodnja in vitro; Percoll; BoviPure; swim-up; parametri sperme; HOS; SYBR-14/PI; EthD-1/FITC-PSA
(sperm; bull; in vitro fertilization; Percoll; BoviPure; swim-up; sperm evaluation parameters; HOS; SYBR-14/PI; EthD-1/FITC-PSA)

Sažetak
Istraživanjem najučinkovitije metode pripreme sperme za IVF, odabrali smo grupu od 5 bikova simentalske pasmine koji su u 2002. godini imali NR (non-return) od 50 i više % na više od 1000 plotkinja. Duboko smrznutu-odmrznutu spermu svih 5 bikova smo pomiješali načinivši pool, a zatim ocjenili parametre sperme. Pokretljivosti je bila 50 %, koncentracija 82, 33 x 106/mL spermija. Testovima HOS i SYBR- 14/PI smo dobili 39, 05 i 42, 97 % spermija s intaktnim plazminim membranama, a integritet akrosome živih spermija iznosio je 46, 90 %. Istraživanjem metoda pripreme sperme za IVF (Percoll, BoviPure, klasični swim up i swim up (HA)) ustanovili smo da postoje signifikantne razlike (p<0, 01) između rezultata završnih parametara u odnosu na početne parametre sperme te također kada smo usporedili rezultate polučene tim metodama (p<0, 05). Uspoređujući rezultate početne pokretljivosti s rezultatima završne pokretljivosti spermija ustanovili smo da između njih nema signifikantnih razlika (p>0, 05). Završna pokretljivost spermija iznosila je za BoviPure 66, 67, a za Percoll 64, 17 %. Rezultati dobiveni tim metodama, signifikantno se razlikuju (p<0, 05) od rezultata polučenih metodama swim up (HA) 45 % i klasični swim up 33, 33 %. Međutim, uspoređujući rezultate početne pokretljivosti s rezultatima završne pokretljivosti spermija ustanovili smo da između njih nema signifikantnih razlika (p>0, 05). Rezultati završne koncentracije iznose za Percoll 27, 67, BoviPure 25, 5, klasični swim up 21, 33, a swim up-a (HA) 14, 33 x 106/mL spermija. Uspoređujući rezultate početne koncentracije s rezultatima završne koncentracije spermija, ustanovili smo da između njih postoji signifikantna razlika (p<0, 01) odnosno gubi se koncentracija, dok smo međutim, ustanovili, da za vrijednosti koncentracije među metodama pripreme spermija nema signifikantnih razlika (p>0, 05). Rezultati HOS testa iznosili su za Percoll 56, 58, BoviPure 53, 84, swim up (HA) 44, 45, a za klasični swim up 41, 5 %, dok smo SYBR-14 testom polučili za BoviPure 70, 85, Percoll 68, 65, klasični swim up 47, 48 i swim up (HA) 46, 46 % spermija s intaktnom plazminom membranom. EthD-1/FITC-PSA testom smo dobili za BoviPure 74, 12 , Percoll 67, 46, swim up-a (HA) 51, 66 i klasični swim up 48, 87 % živih spermija s intaktnom akrosomom. Uspoređujući rezultate HOS, SYBR-14/PI i EthD-1/FITC-PSA testova za početnu spermu s rezultatima tih testova polučenih metodama korištenim u našem istraživanju, ustanovili smo da signifikantna razlika (p<0, 05) postoji jedino između rezultata početnih testova i rezultata tih testova za metode Percoll i BoviPure, koje poboljšavaju kakvoću izdvojene sperme. Rezultati HOS i SYBR-14/PI testova dobivenih tim metodama, signifikantno se razlikuju (p<0, 05) od rezultata tih testova polučenih metodama klasičnog swim up-a i swim up (HA). Rezultati EthD-1/FITC-PSA testa za BoviPure signifikantno se razlikuju (p<0, 05) od rezultata tog testa za metode swim up-a (HA) i klasičnog swim up-a koje ne poboljšavaju kakvoću izdvojene sperme. Istraživanjem metoda pripreme sperme za IVF ocjenjivali smo rezultate IVF-a i ustanovili da ne postoje signifikantne razlike (p< 0, 05) između metoda. Rezultati brazdanja jajnih stanica iznose za BoviPure 75, 60, klasični swim up 69, 70, Percoll 61, 58 i swim up (HA) 55, 75 %. Postotci morula i blastocista 7-og dana uzgoja iznose za BoviPure 28, 21, klasični swim up 21, 78, swim up (HA) 21, 62 i Percoll 20, 83 %. Rezultati izvaljenih blastocista 10-og dana uzgoja iznose za BoviPure 14, 48, klasični swim up 11, 66, Percoll 10, 58 i swim up (HA) 9, 37 %. Nije se potvrdilo postojanje jake, signifikantne korelacije između parametara sperme s rezultatima oplodnje in vitro (r<0, 5 ; p>0, 05). Također smo ustanovili da između metoda pripreme sperme za IVF (Percoll, BoviPure, klasični swim up i swim up (HA)) nema signifikantnih razlika (p>0, 05), što znači da je sperma polučena svim metodama pripreme jednako dobra za oplodnju in vitro.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Veterinarska medicina

POVEZANOST RADA