Naslov
Umnožavanje i pročišćavanje adenovirusnih vektora
(Propagation and purification of adenoviral vectors)

Autori
Korbler, Tajana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
27.02

Godina
2001

Stranica
43

Mentor
Ban, Jasna ; Pavelić, Jasminka

Neposredni voditelj
Pavelić, Jasminka

Ključne riječi
adenovirusi; gen p53; gensko liječenje; vektori
(adenoviruses; gene therapy; p53 gene; vectors)

Sažetak
Rekombinantni, replikacijski nesposobni adenovirusni vektori, AdWTp53, s ugrađenom ekspresijskom kazetom divljeg tipa gena p53 te Ad-dl312, bez ugrađenog gena, umnoženi su u komplementirajućim stanicama 293. Stanice su sakupljene, istaložene centrifugiranjem te zamrznute. Odmrzavanjem taloga stanice liziraju i oslobađaju virusne čestice. Tako dobiveni grubi virusni lizat pročišćen je ultracentrifugiranjem u gradijentu gustoće cezijevog klorida. Pročišćenim virusnim vektorima određen je titar. Vektorima AdWTp53 zaražene su stanice karcinoma grlića maternice HeLa u rasponu koncentracija od MOI 10 - 400, pri čemu je već kod MOI 10 dobivena inhibicija rasta stanica od 50% treći dan nakon zaražavanja. Kontrolni vektor Ad-dl312 nije značajno inhibirao rast stanica. Pojačana ekspresija proteina p53 u stanicama HeLa zaraženim vektorom AdWTp53 dokazana je imunocitokemijskom metodom.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA