hrvatski

Tekuća biopsija – novi pristup u dijagnozi, predviđanju i praćenju terapijskog odgovora te procjeni ishoda malignih bolesti

Tekuća biopsija neinvazivan je i ponovljiv postupak uzimanja periferne krvi iz koje se specifičnim metodama izoliraju cirkulirajuće tumorske stanice (CTC), eksosomi, vezikulne strukture podrijetlom iz tumorskih stanica, te cirkulirajuća tumorska DNA (ctDNA). Navedeni tumorski elementi prisutni u cirkulaciji sadrže genska, RNA i proteinska obilježja tumorskih stanica, dakle potentne biopokazatelje (gene, RNA, proteine) koji zrcale molekulska događanja u tumorskim stanicama i kao takvi mogu poslužiti u dijagnozi, predviđanju terapijskog odgovora i procjeni ishoda bolesti. Tumorske stanice oslobađaju male fragmente DNA putem različitih mehanizama (apoptoza, nekroza). Genske promjene povezane s karcinomom kao što su točkaste mutacije, varijacije broja kopija, preuređenje kromosoma, metilacija DNA mogu se identificirati u ctDNA. ctDNA odražava genska i epigenska svojstva genomske DNA u tumorskim stanicama. Koncentracija ctDNA nije u relaciji s vrstom tumora, lokalizacijom ili stadijem, iako postoje podatci da su koncentracije ctDNA više u bolesnika s težim oblikom bolesti i udaljenim metastazama. ctDNA može predstavljati 0, 01 % - 90 % ukupne cirkulirajuće DNA (cell free DNA, cfDNA). Eksosomi su vezikule nano-veličine (50 – 100 nm). Sastoje se od fosfolipidnog dvosloja i vode podrijetlo od multivezikulnih tijela nastalih tijekom endocitičkog procesa. Eksosomima se pripisuje uključenost u različita biološka događanja poput međustanične komunikacije, stanične signalizacije, regeneracije tkiva, imunosnih reakcija, razvoja i metastaziranja raka. Imaju jedinstvenu sposobnost prijenosa različitih sadržaja tumorskih stanica, od DNA, mRNA, mikroRNA do proteina, što ih čini atraktivnim za profiliranje tumora u dijagnostičke, prediktivne i prognostičke svrhe. Postojanje korelacije između broja CTC-a i duljine preživljenja kod osoba oboljelih od karcinoma dojke pokazano je 2004., a slični rezultati objavljeni su i za druge vrste raka. U CTC-ima se mogu utvrditi genske mutacije kao i promjene u signalnim putovima tako da je moguće pratiti razvoj maligne bolesti i učinkovitost terapije. Danas se koriste brojne inovativne tehnologije za otkrivanje i analizu CTC-a, uključujući CTC-mikročipove, uređaje za filtraciju, molekulske analize, CellSearch™ sustav, metode protočne citometrije te sustav automatizirane mikroskopije.

tekuća biopsija, cirkulirajuće tumorske stanice, eksosomi, cirkulirajuća tumorska DNA

nije evidentirano