hrvatski

Frakcioniranje proteina precipitacijom etanolom i amonijevim sulfatom

Anisakis simplex vrsta je oblića koja obitava u morima, poglavito u atlantskom oceanu i mediteranskom moru. Ovaj se parazitski crv može pronaći u školjkašima, ribama, lignjama i morskim sisavcima. Kod čovjeka može izazvati niz alergijskih reakcija i bolesti. [B.S. Shulman, V.K. Mitenev, A.B. Karasev, Parasitic fauna of cod and pollock in some inlets of the Barents Sea. PINRO, 150 (1993) 24 – 33]. Frakcioinirani su proteini Anisakis simplexa kako bi se frakcije testirale na biološku aktivnost koja bi mogla potaknuti bolest kod čovjeka. Koristile su se metode frakcioniranja apsolutnim etanolom i koncentriranim amonijevim sulfatom, a rezultati su provjereni gel elektroforezom i kromatografskim tehnikama. Zbog male količine raspoloživog materijala, metode frakcioniranja su prvo ispitane koristeći kulture bakterije Esherichia coli. Dobivene frakcije proteina proslijeđene su Institutu za oceanografiju i ribarstvo na daljnje istraživanje. Pokazalo se kako je razdvajanje proteina bilo uspješnije izvedeno kod E. coli nego kod A. simplex. Razdvajanje proteina amonijevim sulfatom bilo je znatno uspješnije nego razdvajanje proteina etanolom. Uspješnost proteinskog frakcioniranja etanolom i amonijevim sulfatom zavisna je o udjelu apsolutnog etanola i koncentriranog amonijeva sulfata u uzorku. Proteini A. simplex nisu se uspješno razdvojili, skoro svi su se istaložili pri najnižem udjelu etanola. Proteini bi se vjerojatno bolje razdvojili da su tretirani s više različitih koncentracija etanola u rasponu od 50% do 66%.

Anisakis simplex, apsolutni etanol, koncentrirani amonijev sulfat, taloženje proteina

nije evidentirano