hrvatski

RAZVOJ I VREDNOVANJE METODE ODREĐIVANJA GLUTATIONA U FARMACEUTSKIM PRIPRAVCIMA SLIJEDNOM ANALIZOM INJEKTIRANJEM UZ SPEKTROFOTOMETRIJSKI DETEKTOR

Optimirana je i vrednovana metoda određivanja glutationa slijednom analizom injektiranjem uz spektrofotometrijski detektor. Metoda se temelji na redoks-reakciji između bakar(II)- neokuproin kompleksa i glutationa (GSH). Glutation reducira bakar(II)-neokuproin te kao produkti nastaju oksidirani oblik glutationa (GSSG) i bakar(I)-neokuproin kompleks koji ima apsorpcijski maksimum pri λ = 458 nm. Optimiranjem parametara protočnog sustava obuhvaćeni su redoslijed injektiranja reagensa i uzorka, brzina strujanja osnovne otopine, volumeni injektiranja analita i uzorka, duljina reakcijske uzvojnice te volumen petlje zadržavanja. Primjenom optimirane metode ostvareno je linearno dinamičko područje (LDP) u rasponu koncentracija od 6, 00 × 10‒7 mol L‒1 do 8, 00 × 10‒5 mol L‒1 uz pripadajuću jednadžbu pravca y = 3270 x – 0, 0010 i koeficijent linearne regresije R2 = 0, 9983. Izmjerene su vrijednosti poslužile kao temelj za računanje granice dokazivanja (LOD = 2, 20 × 10‒7 mol L‒1) i granice određivanja (LOQ = 6, 00 × 10‒7 mol L‒1). Uobičajeno prisutne tvari u farmaceutskim pripravcima nisu interferirale određivanju glutationa u značajno većim koncentracijama. U određivanju analita predloženom metodom interferirali su: limunska kiselina, vinska kiselina, acetilsalicilna kiselina te natrijev citrat. Temeljem 15 uzastopnih injektiranja standardne otopine uzorka utvrđena je ponovljivost metode uz relativno standardno odstupanje, RSD = 3, 80 %. Mjerenjem sintetskih otopina realnog uzorka i standardne otopine glutationa različitih koncentracija vrednovana je točnost metode, koja se kreće od 95 % do 102 %, što se procjenjuje zadovoljavajućim. Uspoređeni su rezultati određivanja glutationa u realnom uzorku predloženom metodom i metodom preporučenom Europskom farmakopejom. Slaganje rezultata (52, 00 mg i 50, 86 mg) upućuje na primjenjivost predložene metode.

slijedna analiza injektiranjem, glutation, spektrofotometrijski detektor

nije evidentirano