hrvatski

Primarna kultura perifernih mononuklearnih stanica miša soja C57BL/6N

Uvod: Primarna kultura stanica dobiva se izolacijom stanica izravno iz tkiva. Uzgojem u odgovarajućim uvjetima, primarne stanice rastu i proliferiraju, ali imaju ograničen životni vijek. Osnovni koraci u uspostavi primarne kulture stanica su dobivanje uzorka, izolacija tkiva, disekcija ili razgradnja tkiva te kultivacija u posudicama za kulturu. Cilj: Uspostava primarne kulture mononuklearnih stanica miša te određivanje uvjeta potrebnih za njihov uzgoj. Materijali i metode: U istraživanju korištena je krv iz srca triju ženki soja CB7BL/6N koje smo pulirali. Miševi su uzgojeni u vivariju Medicinskog fakulteta Osijek. Limfociti su iz krvi izolirani metodom gradijenta gustoće pomoću Lymphoprep otopine. Kultivirane stanice čuvaju se u CO2 inkubatoru u atmosferi 5% CO2/37°C. Za održavanje primarne kulture mononuklearnih stanica koristi se RPMI 1640 definirani medij. Broj živih stanica u kulturi određen je u testu vijabilnosti sa bojom tripansko plavilo u Bürker-Türk-ovoj komorici. Rezultati: Uspostavljena je primarna kultura perifernih mononuklearnih stanica. Broj živih stanica u kulturi 0.dan bio je 213, 75 x 〖10〗^4 stanica/ml. Zaključak: Uspostava primarne kulture perifernih mononuklearnih stanica miša moguća je pridržavanjem pravila aseptične metode i uzgojem u strogo kontroliranim uvjetima u kojima stanice mogu preživjeti i do osam dana.

limfociti, stanična kultura, primarna kultura stanica, miš

nije evidentirano