hrvatski

Izražaj čimbenika neovaskularizacije u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije u CD26 deficijentim miševima

Uvod: Dipeptidil-peptidaza IV, odnosno molekula CD26 (DPP IV/CD26) ubikvitaran je transmembranski protein i serinska proteaza koja cijepa brojne biološki aktivne supstrate među kojima i one važne u regulaciji koncentracije glukoze u krvi. Prethodna istraživanja ukazala su na važnu ulogu DPP IV/CD26 u procesu angiogeneze, migracije stanica i apoptoze. Međutim, patofiziološki procesi cijeljenja rana u dijabetesu, koji predstavljaju značajan javnozdravstveni problem, nedovoljno su razjašnjeni. Pretpostavka ovog istraživanja je da DPP IV/CD26 ima važnu ulogu u procesu cijeljenja rana u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije putem utjecaja na izražaj ključnih čimbenika neovaskularizacije. Cilj istraživanja bio je uspostaviti pokusni model dijabetesa te model cijeljenja rana u CD26 deficijentnom (CD26-/-) i u divljem tipu miša (C57BL/6), te ispitati utječe li nedostatak DPP IV/CD26 na izražaj važnih čimbenika neovaskularizacije (VEGF i HIF-1α), praćenjem makroskopskih i mikroskopskih promjena tijekom procesa regeneracije i reparacije tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Materijali i metode: Pokusnim životinjama CD26-/- i C57BL/6 soja induciran je eksperimentalni dijabetes intraperitonealnom aplikacijom otopine streptozotocina u citratnom puferu u dozi od 50 mg/kg tijekom 5 dana. Razvoj dijabetesa potvrđen je temeljem kliničkih, biokemijskih i histoloških parametara. Potom su pokusnim životinjama inducirane rane na dorzalnom dijelu tijela te su životinje žrtvovane drugog, četvrtog, sedmog, desetog i petnaestog dana cijeljenja rana. Provedena su histomorfometrijska, patohistološka i imunohistokemijska istraživanja na uzorcima tkiva rana, kontrolnih koža i gušterači. Određivan je izražaj čimbenika neovaskularizacije VEGF i HIF-1α, stupanj regeneracije koriuma te stupanj neovaskularizacije koriuma. Spektrofotometrijski je praćena enzimska aktivnost DPP IV/CD26 u tkivu kože rana divljeg tipa životinja tijekom procesa cijeljenja rana tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Rezultati: Analiza rezultata potvrdila je bolju toleranciju glukoze u CD26-/- soju miševa u odnosu na divlji tip. Histomorfometrijska analiza tkiva rana pokazuje veći stupanj regeneracije koriuma i smanjeno trajanje upalne faze u CD26-/- soju miševa dok C57BL/6 miševi pokazuju sporije stvaranje novog epidermisa i prekrivanje rane. Nadalje, nedostatak DPP IV/CD26 pozitivno utječe na bujanje veziva i retrakciju tkiva. Izražaj čimbenika neovaskularizacije HIF-1α i VEGF statistički je značajno viši (p<0, 05) kod CD26-/- životinja u odnosu na C57BL/6 soj, u svim ispitivanim danima cijeljenja tkiva. Broj novostvorenih kapilara u koriumu statistički je značajno viši (p<0, 05) sedmog i desetog dana u CD26-/- soju u odnosu na C57BL/6 soj. Enzimska aktivnost DPP IV/CD26 statistički je značajno snižena (p<0, 05) u tkivu rana u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije kod C57BL/6 miševa drugog, četvrtog i sedmog dana cijeljenja u odnosu na odgovarajuću kontrolu. Zaključak: Potvrđena je pretpostavka o značajnoj ulozi DPP IV/CD26 u homeostazi glukoze te u procesu regeneracije i reparacije tkiva u uvjetima eksperimentalne hiperglikemije. Nedostatak molekule CD26 povezan je s boljom tolerancijom glukoze, manje izraženim upalnim odgovorom, povećanjem izražaja čimbenika neovaskularizacije HIF-1α i VEGF te poboljšanom neovaskularizacijom koriuma u procesu cijeljenja rana kože. Dobiveni rezultati ukazuju na značajnost inhibicije DPP IV/CD26 kao moguće terapije u liječenju poremećaja cijeljenja rana u oboljelih od dijabetesa.

cijeljenje rana, dijabetes, dipeptidil-peptidaza IV (DPP IV/CD26), HIF-1α, hiperglikemija, neovaskularizacija, VEGF

nije evidentirano