hrvatski

Somatska embriogeneza u kalusnom tkivu lucerne (Medicago sativa L.)

Indukcija somatske embriogeneze i dobivanje regeneriranih biljaka ispitana je u kulturi tkiva tri sorte lucerne (Medicago sativa L.) - Slavonka, Osječka 66 i Szarvasi-4. Za indukciju kalusa korišteni su eksplantati tkiva hipokotila, peteljke i plojke listića sterilno isklijalih biljaka starih od šest do šezdeset dana. Svaki postupak sastojao se od tri ili četiri faze kultiviranja na tri ili četiri podloge koje su se međusobno razlikovale u sastavu makro- i mikroelemenata, sadržaju hormona i vremenskom trajanju uzgoja kulture. Indukcija kalusa dobivena je na eksplantatima na svim testiranim indukcijskim podlogama: MS s 2 mg/L 2, 4-D i 0, 25mg/L kinetina (postupak I) ; B5h s 1 mg/L 2, 4-D i 0, 2 mg/L kinetina (postupak II) ; SH s 4, 65 mg/L NAA i 2, 15 mg/L kinetina (postupak III) ; te SH s 2 mg/L 2, 4-D, 0, 26 mg/L kinetina i 2 g/L ekstrakta kvasca (postupak IV). Najpogodnija sorta za razvitak kalusa bila je Osječka 66 koja je kalusirala na svim podlogama u visokom postotku eksplantata. Indukcijske podloge iz postupka III i IV poticale su kalusiranje u svim kulturama. Sorta Osječka 66 imala je najviši embriogeni kapacitet, no i na eksplantatima sorte Slavonka (u svim postupcima) i Szarvasi-4 (u svim postupcima) dobivene su embriogene kulture, iako u manjem broju genotipova. Eksplantati plojke i peteljke listića bili su pogodniji za dobivanje embriogenih kultura od eksplantata hipokotila. Postupak III - prijenos kalusnih kultura na podlogu s L-prolinom i 30 mg/L maltoze nakon tri dana na SH-mediju s visokom koncentracijom 2, 4-D (11 mg/L i 1 mg/L kinetina) - bio je najpogodniji za indukciju i razvitak somatskih embrija. Biljke iz embrija razvile su se nakon prijenosa kultura (embrija) na podlogu SH s 0, 02 mg/L 2iP i 0, 02 mg/L IAA (postupak I i II), i 1/2xSH s 15 g/L saharoze (postupak III). Mikrokloniranje regenerata postignuto je poticanjem rasta aksilarnih pupova u kulturi nodalnih segmenata na podlozi MS s 1 mg/L BA.

Somatska embriogeneza, kultura tkiva, kalus, lucerna

nije evidentirano