hrvatski

Elektrokemijsko određivanje razine metalotioneina metodom po Brdički u bioti iz rijeke Krke

Zahvaljujući sedrenim barijerama te brojnim slapištima i jezerima, veći dio toka rijeke Krke proglašen je nacionalnim parkom 1985. godine. Uzvodno od sjeverne granice parka tehnološke otpadne vode tvornice vijaka i komunalne otpadne vode grada Knina ugrožavaju ekološko stanje rijeke Krke te je cilj istraživanja procijeniti utjecaj na biotu praćenjem koncentracija metalotioneina (MT), biomarkera izloženosti metalima te citosolskih metala u rakušcima (Gammarus fossarum Koch, 1836.) i probavilu potočne pastrve (Salmo trutta Linnaeus, 1758.) tijekom dvije sezone (listopad i travanj) na izvoru rijeke Krke (referentna postaja) i nizvodno od Knina (postaja pod utjecajem otpadnih voda). MT su niskomolekulski citosolski proteini s viskim udjelom tiolnih skupina (30 %) čija je uloga održavanje homeostaze esencijalnih i detoksifikacija toksičnih metala, a porast njihove koncentracije ukazuje na izloženost metalima, osobito Zn, Cu, Cd, Ag koji su glavni MT induceri [1]. Mjerenje MT se provodi diferencijalnom pulsnom voltametrijom, metodom po Brdički, kojom se određuju proteini s tiolnim skupinama u amonijačnoj otopini kobaltove (III) soli [2]. Budući da su MT toplinski stabilni proteini, uzorci su prije mjerenja toplinski obrađeni na 85 °C. Na uređaju 797 Computrace (Metrohm) s troelektrodnim sustavom uz točno definirane uvjete mjerenja [3] određen je katalitički val vodika na potencijalu od -1, 48 V, čija je visina proporcionalna koncentraciji MT. Kao kalibrant je korišten MT-2 zečje jetre (Enzo) otopljen u 0, 25 M NaCl. Koncentracija MT (mg/g) je u obje sezone viša u rakušaca (2, 4-3, 4), nego u probavilu riba (0, 9-1, 5). Povišene razine MT su izmjerene u obje populacije s onečišćene postaje u odnosu na one s izvora rijeke Krke, statistički značajno u proljeće u rakušaca (2, 43 na izvoru i 2, 87 kod Knina). Samo u rakušaca postoje i sezonske razlike, sa značajno višim razinama MT u proljeće, nego u jesen. Kao i MT, koncentracije većine citosolskih metala imaju isti trend s višim koncentracijama u organizama s onečišćene postaje, s izuzetkom Cd, Rb, Tl, Cs koji su statistički značajno viši u obje sezone u organizama s izvora rijeke Krke, ali očito ne doprinose pobudnoj sintezi MT.

metalotioneini ; Brdičkina reakcija ; metali ; potočna pastrva

nije evidentirano