hrvatski

Usporedba GeneXpert BCR-ABL Ultra Assay sa standardiziranim laboratorijskim protokolom kvantifikacije fuzijskog prijepisa BCR/ABL1 u bolesnika s kroničnom mijeloičnom leukemijom

UVOD: Praćenje minimalne ostatne bolesti kod KML bolesnika koji su na terapiji inhibitorima tirozin-kinaze (TKI) jedna je od najbolje standardiziranih molekularnih metoda (Gabert JA i sur, Leukemia 2003, Cross N. i sur, Leukemia 2015). Na tržištu postoje brojni paketi gotovih reagensa za molekularno praćenje bolesti koji omogućuju izražavanje rezultata prema međunarodnoj ljestvici (engl. International Scale -IS) s visokom osjetljivošću. Smjernice za liječenje ovih bolesnika uključuju procjenu molekularnog odgovora (MR) na temelju %IS u definiranim vremenskim točkama, a postizanje pravodobnog MR nužno je za utvrđivanje statusa bolesti te primjenu odgovarajuće terapije. CILJ: Usporediti GeneXpert BCR-ABL Ultra Assay sa standardiziranim protokolom (SP) te utvrditi pouzdanost procjene MR na temelju dobivenih rezultata ispitivanim testom. BOLESNICI I METODE: U istraživanje je uključeno 30 KML bolesnika kojima je venepunkcijom uzeta periferna krv. Dio uzorka (4 ml) obrađen je prema protokolu proizvođača te analiziran s pomoću GeneXpert BCR-ABL Ultra Assay (Cepheid, SAD). Od ostatka uzorka uzeto je 2x10e7 leukocita, izdvojena RNA Trizolom te kvantificiran fuzijski prijepis BCR/ABL1 PCR-om u stvarnom vremenu (LightCycler 2.0, Roche) prema SP. Rezultati za obje analize izraženi su kao %IS te je procijenjen MR prema Cross N. i sur, Leukemia 2015. REZULTATI: Kvantifikacijom fuzijskog prijepisa BCR/ABL1 SP-om dobiven je medijan 0, 0227 %IS (raspon od 0 do 52, 08 %IS), a GeneXpertom medijan 0, 0051 %IS (0, 0001 do 40 %IS). Obradom rezultata pokazalo se da nema statistički važne razlike u rezultatima izraženima u %IS, p=0, 339, a dobiven je i Spearmanov koeficijent korelacije 0, 817 (CI = 0, 648 do 0, 910). Osjetljivost analiza izračunana je prema ekspresiji kućepaziteljskog gena ABL1, a statistički se razlikuje u ove dvije metode p=0, 004. Bolesnici su prema procijenjenom MR dobiveni SP-om podijeljeni u 3 skupine (9 bolesnika s MR3, 9 bolesnika s MR3 te 12 bolesnika s ≥MR4). Usporedbom procijenjenih MR 14/30 bolesnika imalo je potpuno identični MR s obje metode. Nadalje, 4/30 bolesnika imalo je niži MR dobiven GeneXpertom, dok je 10/30 bolesnika imalo viši MR (većina iz skupine ≥MR4) u odnosu na SP. U 2/30 slučajeva GeneXpertom dobiven je MR5 za bolesnike koji su imali SP-om ≤MR3. ZAKLJUČAK: Dobra korelacija rezultata te jednostavnost i brzina izvođenja GeneXpert BCR-ABL Ultra Assay omogućuje uporabu ovog sustava u rutinskom praćenju bolesnika na terapiji TKI.

bcr-abl1, KML, kvantitativni PCR, usporedba metoda

nije evidentirano